柔肝降酶方含药血清抑制人肝星状细胞的活化及自噬

背景：自噬在肝纤维化中发挥重要作用，可以通过诱导肝星状细胞活化促进肝纤维化的进程。前期研究表明，柔肝降酶方具有保护肝功能、抗炎、抗氧化应激反应等作用，其是否通过自噬抗肝纤维化的作用机制尚未阐明。目的：探讨柔肝降酶方含药血清对脂多糖诱导的人肝星状细胞活化及自噬的影响及其潜在的作用机制。方法：用脂多糖建立人肝星状细胞活化模型，分成不同的处理组：(1)空白组：人肝星状细胞+空白血清；(2)模型组：人肝星状细胞+空白血清+脂多糖；(3)柔肝降酶方低、中、高剂量含药血清组：人肝星状细胞+低、中、高剂量柔肝降酶方含药血清+脂多糖；(4)柔肝降酶方高剂量含药血清联合雷帕霉素组：高剂量组基础上+雷帕霉素；(5)柔肝降酶方高剂量含药血清联合PI3K抑制剂组：高剂量组基础上+LY294002。CCK-8法观察细胞增殖情况；采用单丹磺酰尸胺染色法观察细胞自噬情况；WesternBlot检测细胞通路蛋白(PI3K、P-PI3K、AKT、P-AKT、mTOR、P-mTOR)、自噬相关蛋白(P62、Beclin-1、LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ)、人肝星状细胞活化标志蛋白(α-平滑肌肌动蛋白、Ⅰ型胶原纤维)表达水平的影...