| siRNA干扰转化生长因子β1表达对SD大鼠系膜细胞纤维连接蛋白的影响 |
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| 作者姓名： | Mao HX Yi ZW Wu XC Dang XQ He XJ Cao Y Mo SH |
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| 作者单位： | 中南大学湘雅二医院小儿肾脏病研究室,长沙,410011 |
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| 基金项目： | 基金项目：教育部高等学校博士学科点专项科研基金（20040533043） |
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| 摘 要： | 目的利用能够表达大鼠转化生长因子β1（TGF-β1）siRNA的绿色荧光蛋白融合表达质粒载体（pGEFP-C1）转染SD大鼠系膜细胞系、干扰TGF-β1的表达,观察系膜细胞纤维连接蛋白（FN）的相应变化,探讨防治肾脏纤维化的新途径。方法根据大鼠TGF-β1基因序列第538-556（A）和895-913（B）核苷酸序列,将A、B二段序列分别构建成小发夹结构,分别（A／B）或共同（A＋B）插入一个pGEFP-C1载体中,得到3个重组载体,能够分别或同时表达针对A或（和）B序列的siRNA,分别转染系膜细胞后,通过ELISA和RT-PCR动态观察系膜细胞TGF-β1、FN的mRNA和细胞培养上清中蛋白浓度的变化,探讨二者变化的相互关系。结果载体表达的siRNA与TGF-β1基因第538-556序列相同者,能够显著干扰48h时间段TGF-β1 mRNA（RT-PCR）（P〈0．01）和蛋白分泌（细胞上清ELISA）（P〈0．01）,脂质体转染刺激系膜细胞FN分泌显著增加,表现为对照组和TGF-β1未被有效干扰组,FN分泌于24h时段达到峰值,而TGF-β1被干扰的实验组,FN峰值被推迟到48h才出现（P〈0．01）。结论siRNA干扰系膜细胞TGF-β1的表达,能够减少FN的表达,但FN的表达可能并不完全依赖于TGF-β1。
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| 关 键 词： | RNA 小分子干扰 转化生长因子β 肾小球膜 大鼠 SPRAGUE-DAWLEY 纤维连接蛋白类 |
| 修稿时间： | 2006-11-21 |
Effects of siRNAs silencing transforming growth factor-beta1 on fibronectin in SD rat masangial cells |
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| Mao HX,Yi ZW,Wu XC,Dang XQ,He XJ,Cao Y,Mo SH.Effects of siRNAs silencing transforming growth factor-beta1 on fibronectin in SD rat masangial cells[J].Chinese Journal of Pediatrics,2007,45(7):494-497. |
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| Authors: | Mao Hua-xiong Yi Zhu-wen Wu Xiao-chuan Dang Xi-qiang He Xiao-jie Cao Yan Mo Shuang-hong |
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| Institution: | Clinical Center of Pediatric Nephrology, The Second Xiangya Hospital, Central South University, Changsha 410011, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | RNA small interfering Transforming growth factor beta Glomerular mesangium Rats Sprague-Dawley Fibronectin |
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