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梅毒螺旋体重组蛋白Tp0136的表达、纯化及免疫活性分析
引用本文:龙福泉,王千秋,张津萍,龚匡隆.梅毒螺旋体重组蛋白Tp0136的表达、纯化及免疫活性分析[J].中华皮肤科杂志,2012,45(6).
作者姓名:龙福泉  王千秋  张津萍  龚匡隆
作者单位:中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所,南京,210042
基金项目:江苏省自然科学基金面上项目
摘    要:目的 克隆并表达梅毒螺旋体Tp0136基因,对其表达产物进行纯化以及免疫活性分析.方法 全基因合成Tp0136基因,构建E,coli表达载体;诱导表达并纯化重组蛋白,用SDS-PAGE和Western 印迹鉴定.用纯化的重组蛋白Tp0136免疫新西兰兔,并以重组Tp0136作为包被抗原建立间接酶联免疫吸附试验( ELISA)以鉴定其免疫原性,Western印迹检测梅毒阳性血清鉴定其免疫反应性.结果 成功构建E.coli表达载体pET28a-Tp0136,并表达和纯化出膜蛋白Tp0136,相对分子质量为50 000,纯度>95%.用重组蛋白Tp0136免疫新西兰兔,能刺激其产生高滴度抗体,具有较强的免疫原性.Western印迹显示其能与梅毒阳性血清发生特异性反应,具有较好的免疫反应性.结论 成功表达具有Tp0136全基因和较强免疫活性的膜蛋白,Tp0136可能在梅毒螺旋体的免疫致病机制中起到重要作用.

关 键 词:密螺旋体  苍白  Tp0136  基因表达  膜蛋白质类  免疫活性

Expression, purification and immunocompetence analysis of a recombinant membrane protein, Tp0136, of Treponema pallidum
LONG Fu-quan , WANG Qian-qiu , ZHANG Jin-ping , GONG Kuang-long.Expression, purification and immunocompetence analysis of a recombinant membrane protein, Tp0136, of Treponema pallidum[J].Chinese Journal of Dermatology,2012,45(6).
Authors:LONG Fu-quan  WANG Qian-qiu  ZHANG Jin-ping  GONG Kuang-long
Abstract:
Keywords:Treponema pallidum  Tp0136  Gene expression  Membrane proteins  Immunocompetence
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