核转录因子-κB-圈套抑制血管内皮细胞核转录因子-κB激活机制的探讨 |
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引用本文: | 李磊,汤耀卿,纪玉宝,毛恩强,瞿洪平,张圣道.核转录因子-κB-圈套抑制血管内皮细胞核转录因子-κB激活机制的探讨[J].外科理论与实践,2005,10(3):248-251. |
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作者姓名: | 李磊 汤耀卿 纪玉宝 毛恩强 瞿洪平 张圣道 |
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作者单位: | 上海第二医科大学附属瑞金医院外科上海消化外科研究所 上海200025
(李磊,汤耀卿,纪玉宝,毛恩强,瞿洪平),上海第二医科大学附属瑞金医院外科上海消化外科研究所 上海200025(张圣道) |
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摘 要: | 目的:观察核转录因子(NF)-κB圈套(decoy)对脂多糖(LPS)刺激后人脐静脉内皮细胞NF-κB激活的抑制作用,并就其作用机制进行探讨。方法:获取和培养人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs),平均分成4组。NF-κB-圈套组和错配-圈套组分别预先以NF-κB-圈套-Lipofectamine2000复合物和错配-圈套-Lipofectamine2000复合物(对照组)处理,LPS组和对照组分别加入同体积的培养液,观察荧光标记DNA转染细胞情况。用10μg/mlLPS刺激2h激活NF-κB,收集细胞,分别提取细胞核蛋白,检测不同组NF-κB活性以及P65和P50亚基蛋白质含量。结果:转染5h后大于90%细胞核内可观察到绿色荧光。NF-κB-圈套组NF-κBP65亚基活性显著低于错配-圈套组和LPS组,但P65和P50亚基蛋白质含量两组之间无显著差异。结论:NF-κB-圈套能抑制细胞核内NF-κB的DNA结合活性,这一作用可能是NF-κB-圈套转入细胞核后占据转录因子核定位区的结果。
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关 键 词: | 炎症 核因子-κB 圈套 细胞因子 脂多糖 |
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