人骨髓间充质干细胞向成骨细胞和成软骨细胞分化的能力

背景：利用骨髓间质干细胞(mesenchymal stem cells，MSCs)的多向分化性，选择合适的生物材料和适当的生长因子联合应用，可达到修复组织缺损的目的，MSCs细胞具有取材方便，对身体健康损害小，来源于自体干细胞诱导构建的组织不存在MHC限制等优点，所以日益受到人们的重视。目的：探讨人骨髓间充质干细胞向成骨和成软骨细胞诱导分化的能力。设计：单一样本研究。单位：苏州大学附属儿童医院骨科，苏州大学生命科学院生物技术研究所。材料：RPMI1640完全培养基，地塞米松，β-甘油磷酸钠，抗坏血酸，鼠抗人一抗，羊抗鼠二抗，链球菌亲和素(三抗)，DAB(1：50)，100mL／L胎牛血清，维生素C，转化生长因子-β1(TGF-B1)等。方法：选用不同代次的MSCs细胞，分别使用成骨和成软骨条件培养基培养，观察细胞的形态学变化，同时采用细胞化学和免疫组化的方法检测碱性磷酸酶，钙盐沉积，糖胺多糖分泌和I，Ⅱ胶原的表达。主要观察指标：骨髓基质干细胞向成骨细胞分化；骨髓基质干细胞向成软骨细胞分化。结果：MSCs细胞在地塞米松、维生素C和β-甘油磷酸钠的作用下，15d后可见细胞变为多边形，ALP和Ⅰ型胶原染色阳性，形成钙结节，表现成骨细胞分化特点；而在维生素C和TGF-β1的作用下，7d可见细胞多为圆形，糖胺多糖和Ⅱ型胶原染色阳性，表现成软骨细胞分化特点。但细胞分化特征的表达随细胞增殖有减弱趋势。结论：在一定培养条件下成功诱导人MSCs细胞向成骨和成软骨细胞分化，为进一步研究打下基础。