| miR99a-5-p在结核分枝杆菌感染宿主巨噬细胞中的免疫调控作用 |
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| 作者姓名： | 史雨婷 董静 贾红彦 朱传智 杨斌 李自慧 孙琦 杜博平 邢爱英 张宗德 潘丽萍 |
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| 作者单位： | 1. 首都医科大学附属北京胸科医院/北京市结核病胸部肿瘤研究所耐药结核病研究北京市重点实验室;2. 首都医科大学附属北京胸科医院/北京市结核病胸部肿瘤研究所肿瘤研究中心 |
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| 摘 要： | 目的:初步探讨结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis, MTB)感染THP-1细胞内特异miRNA在宿主抗结核免疫中的作用。方法:提取MTB感染及未感染THP-1细胞RNA,基于Illumina NovaSeq6000二代测序平台检测THP-1细胞内miRNA表达谱。采集4名健康受试者6 ml外周血并分离人原代巨噬细胞。应用实时荧光PCR(qRT-PCR)技术验证MTB感染THP-1细胞内特异miRNA并检测人原代巨噬细胞中靶标miRNA的表达水平。构建miRNA过表达载体，经慢病毒转染THP-1巨噬细胞获得稳定的过表达细胞株，使用qRT-PCR检测H37Rv感染的miRNA过表达细胞及对照空载体细胞中的肿瘤坏死因子α(TNF-α)及γ-干扰素(IFN-γ)表达水平。结果:从16个二代测序结果表达差异明显的miRNA分子中选取既往未作研究且差异最为明显的miR-99a-5p(P=0.021)作为研究靶基因。通过qRT-PCR在THP-1细胞及原代巨噬细胞中验证，发现miR-99a-5p在THP-1感染组和原代巨噬细胞内的表达量(分别为0.482±0.148和...
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| 关 键 词： | 分枝杆菌,结核 芯片分析技术 微RNAs 巨噬细胞 免疫调节 |
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