| 5-氮杂脱氧胞苷对肝癌细胞HepG2中抑癌基因FHIT表达的影响 |
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| 引用本文： | 李洪利,张伟栋,李文通,尹崇高. 5-氮杂脱氧胞苷对肝癌细胞HepG2中抑癌基因FHIT表达的影响[J]. 癌症, 2009, 28(9): 967-971 |
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| 作者姓名： | 李洪利 张伟栋 李文通 尹崇高 |
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| 作者单位： | 山东省潍坊医学院医学研究实验中心,山东潍坊,261042;潍坊医学院病理学教研室,山东潍坊,261042;潍坊医学院护理学院,山东潍坊,261042 |
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| 摘 要： | 背景与目的：肝癌细胞中由于FHIT基因过度甲基化而导致其表达降低。本实验应用甲基化酶抑制剂5-氮杂脱氧胞苷（5-Aza-2’deoxycytidine，5-Aza—dc）作用肝癌细胞株HepG2。观察用药后肝癌细胞中FHITmRNA和蛋白表达的变化，并观察5-Aza-dC对细胞增殖的影响。方法：以5-Aza—dC作用HepG2细胞．采用甲基化特异性聚合酶链反应（methylation—specific polymerase chain reaction，MSP）检测HepG2细胞中FHIT甲基化变化；采用RT-PCR检测FHITmRNA的表达：采用细胞免疫组织化学染色和Western blot方法检测FHIT蛋白表达，MTT法检测HepG2细胞增殖情况。结果：5-Aza—dC处理前，HepG2细胞FHIT基因呈甲基化状态，mRNA及蛋白表达缺失；经5-Aza—dC作用后，MSP显示HepG2细胞FHIT基因甲基化逆转：经1．0μmol／L、2．0μmol／L及4．0μmol／L的5-Aza—dC作用48h后，FHIT基因mRNA扩增出产物的吸光度值分别为0．80±0．32、1.41±0．54和1．51±0．61。Western blot检测产物积分灰度值分别为0．33±0．20、1．00±0．26和1．12±0．38：当药物浓度达到1．0μmol／L时出现了对HepG2细胞增殖的抑制作用。结论：5-Aza—dC能明显逆转HepG2细胞的FHIT基因异常甲基化，激活因高甲基化所致基因沉默的再转录，诱导该基因的表达；同时抑制细胞增殖。
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| 关 键 词： | 5-氮杂脱氧胞苷 肝肿瘤 FHIT基因 甲基化 甲基化特异性聚合酶链式反应 |
Effect of 5-Aza-dC on FHIT gene expression in hepatocellular carcinoma cell line HepG2 |
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| Affiliation: | Hong-Li Li, Wei-Dong Zhang, Wen-Tong Li, Chong-Gao Yin (1. Medicine Research Experiment Center of Science Research, Weifang Medical College, Weifang, Shandong, 261042, P. R. China; 2. Department of Pathology, Weifang Medical College, Weifang, Shandong, 261042, P. R. China ;3. Department of Nursing, Weifang Medical College, Weifang, Shandong, 261042, P. R. China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | 5-Aza-2＇-deoxycytidine liver neoplasm FHIT gene methylation methylation-specific PCR |
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