流式细胞术检测培养细胞表面抗原的样品制备方法探讨

目的：探讨不同样品制备方法对贴壁培养细胞表面抗原的影响。方法：应用EDTA、胰酶、细胞刮、联用EDTA及细胞刮制备培养人视网膜色素上皮细胞单细胞悬液。采用流式细胞仪检测人视网膜色素上皮细胞表面HLA—DR及ICAM-1的表达和细胞数。结果：单用EDTA或细胞刮制备的细胞悬液中细胞产量低，胰酶或联用EDTA及细胞刮制备的细胞悬液中细胞产量高（F=263．63，P〈0．001）。胰酶组细胞表面HLA—DR和ICAM-1的荧光强度明显降低，且以HLA—DR抗原下降比例较多（HIA—DR：F=3．77，P=0．022；CD54：F=10．33，P〈0．001）。EDTA组、细胞刮组、EDTA联合细胞刮组间HLA—DR和ICAM-1的荧光强度表达差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：EDTA联合细胞刮法是贴壁培养细胞制备单细胞悬液的一种好方法。