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小鼠成纤维细胞饲养层的制备及C57BL/6小鼠胚胎干细胞系的建立
引用本文:张小梅,方廖琼,王智彪. 小鼠成纤维细胞饲养层的制备及C57BL/6小鼠胚胎干细胞系的建立[J]. 吉林大学学报(医学版), 2012, 38(6): 1081-1085
作者姓名:张小梅  方廖琼  王智彪
作者单位:重庆医科大学生物医学工程学院 省部共建超声医学工程国家重点实验室超声医学工程重庆市市级重点实验室,重庆,400016;重庆医科大学生物医学工程学院 省部共建超声医学工程国家重点实验室超声医学工程重庆市市级重点实验室,重庆,400016;重庆医科大学生物医学工程学院 省部共建超声医学工程国家重点实验室超声医学工程重庆市市级重点实验室,重庆,400016
基金项目:国家重点基础研究发展计划(973计划)项目资助课题(2011CB707902)
摘    要:目的:制备小鼠成纤维细胞饲养层并建立C57BL/6小鼠胚胎干细胞(ESC)系,为进一步建立人ESC系提供依据。方法:取妊娠12.5~14.5 d的胎鼠,组织消化法分离培养小鼠胚胎成纤维细胞(MEF);收集C57BL/6小鼠3.5 d的囊胚培养于小鼠制作的饲养层上;分离内细胞团(ICM),扩增传代40代以上。观察ESC集落的生长情况。采用碱性磷酸酶(AKP)染色、免疫组织化学早期胚胎特异性表面抗原(SSEA-1)、八聚体结合转录因子4(OCT-4)染色和体内分化实验对ESC集落进行鉴定。结果:分离培养后得到的ESC可稳定传代至40代以上,且均呈集落样生长。经AKP、SSEA-1和OCT-4染色后ESC均呈红褐色阳性表达,接种于裸鼠均可形成畸胎瘤;HE染色,有3个胚层组织成分。结论:成功建立了C57BL/6小鼠ESC系。

关 键 词:胚胎成纤维细胞  C57BL/6小鼠  胚胎干细胞  碱性磷酸酶
收稿时间:2012-04-28

Preparation of mouse fibroblast feeder layers and establishment of embryonic stem cell lines of C57BL/6 mice
ZHANG Xiao-mei,FANG Liao-qiong,WANG Zhi-biao. Preparation of mouse fibroblast feeder layers and establishment of embryonic stem cell lines of C57BL/6 mice[J]. Journal of Jilin University: Med Ed, 2012, 38(6): 1081-1085
Authors:ZHANG Xiao-mei  FANG Liao-qiong  WANG Zhi-biao
Affiliation:
(Key Laboratory of Ultrasound Engineering in Medicine Co-founded by Chongqing and Ministry of Science and Technology,Chongqing Key Laboratory of Ultrasound Engineering in  |Medicine,School of Biomedical Engineering,Chongqing Medical University,Chongqing 400016,China)
Abstract:
Keywords:embryonic fibroblast  C57BL/6 mouse  embryonic stem cell  alkaline phosphatase
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