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PP~(60c-Src)在血管紧张素对大鼠血管平滑肌细胞信息转导中的作用
作者姓名:项美香  刘东  陈鹏  吕俊升
作者单位:浙江大学医学院附属第二医院 浙江杭州310009(项美香,刘东,陈鹏),浙江大学医学院附属第二医院 浙江杭州310009(吕俊升)
基金项目:国家自然科学基金资助项目 (39770 319)
摘    要:目的 :通过观察 c- Src在 Ang 对大鼠血管平滑肌细胞 (VSMC)丝裂原活化的蛋白激酶 (MAPK)活性和c- fos蛋白表达的影响 ,以进一步了解 Ang 促 VSMC增殖的细胞内信息转导机制。方法 :原代和传代培养 SD大鼠主动脉 VSMC,以脂质体包裹反义 c- Src寡脱氧核苷酸 (Oligodeoxynucleotides ODNs)转染培养的 VSMC以抑制 c- Src蛋白表达和激酶活性。以未转染的 VSMC为对照 ,观察 10 -7mol/ L Ang 刺激对转染的 VSMC的 MAPK活性和 c- fos蛋白表达的影响。蛋白免疫沉淀和酶自身磷酸化率测定 c- Src激酶活性 ;髓鞘碱性蛋白 (MBP)底物磷酸化率测定 MAPK激酶活性 ;Western blot免疫印迹法测定 c- Src和 c- fos蛋白表达情况。结果 :转染不同浓度反义 c- SrcODNs的 VSMC c- Src蛋白含量呈浓度依赖性降低 ,0 .2 μmol/ L、0 .5 μmol/ L、1.0 μmol/ L和 2 .0 μmol/ L分别为对照的 6 8.2 %、34.7%、30 .3%和 15 .8% ,经方差分析具有显著性意义 (P<0 .0 1)。c- Src激酶活性也显著抑制 ;以 Ang 刺激经转染反义 c- Src ODNs的 VSMC,c- Src激酶活性增幅仅为对照组的 8.7% ;MAPK活性仅为对照的 1.6 % ;c- fos蛋白表达的增幅为对照组的 30 .0 %。结论 :Ang 可诱导 VSMC c- Src激活和细胞内信息转导 ,且 Ang 引起的 MAPK和 c- fos

关 键 词:血管紧张素  蛋白激酶类  血管平滑肌细胞  c-Src  MAPK  c-fos  大鼠
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