短暂脑缺血再灌注后突触蛋白Ⅰ表达与细胞凋亡

目的：观察短暂脑缺血再灌注对与神经元的早期发育和再生相关的突触蛋白Ⅰ及神经细胞凋亡的影响，进一步了解神经系统的可塑性。方法：实验于2003年于同济医院神经内科实验室进行。①分组：取75只Wister大鼠随机分为模型组（n=51）、假手术组（n=18）和正常对照组（n=6）3组。假手术组18只和模型组18只分为再灌注1，3，6，12，24和72h 6个亚组，进行突触蛋白Ⅰ检测；正常对照组6只和模型组剩余的33只大鼠（分为再灌注1，3，6，12，24，48和72h7个亚组）分别进行TUNEL阳性细胞检测、形态学观察和流式细胞仪检测，需获取数据时至少检测2只大鼠。②造模：模型组采用线栓法建立大鼠大脑中动脉闭塞模型，缺血10min后再灌注；假手术组不插入线栓，其余步骤同模型组；正常对照组不干预。③观察指标：于相应时间点麻醉状态下处死取脑，应用免疫组织化学的方法观察缺血侧额顶叶皮质突触蛋白Ⅰ表达的动态变化，同时采用荧光显微镜、流式细胞仪和脱氧核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法检测细胞凋亡情况，分析两者之间的关系。结果：经补充后72只大鼠进入结果分析。①缺血侧额顶叶皮质突触蛋白Ⅰ的表达：模型组再灌注12h内无明显变化，再灌注24h低于假手术组（0．199&;#177;0．006，0.238&;#177;0．008，P〈0．01），至72h恢复至假手术组水平。②细胞凋亡率：模型组再灌注24，48和72h均高于正常对照组[（12．57&;#177;9．83）％，（13．56&;#177;2．28）％,（16．68&;#177;0．66）％，（4．65&;#177;0．03）％，P〈0．05]。③TUNEL阳性细胞率：正常对照组和模型组再灌注0～24h均未见阳性细胞，再灌注48和72h分别为（47．50&;#177;3．85）％和（62．66&;#177;13．06）％。结论：短暂脑缺血再灌注后存在着突触蛋白Ⅰ表达的短暂降低，且与凋亡细胞的出现在时间上非常吻合，提示短暂脑缺血再灌注后存在失神经及其后的神经再获现象，这可能与DNA的损伤和修复有关。