四重荧光定量RT PCR检测人感染新型甲型禽流感H7N9病毒 |
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引用本文: | 王国政,崔大伟,谢国良,成军,孙长贵,李静云,金美彤,沈雄文,杨先知,楼剑洲,陈瑜.四重荧光定量RT PCR检测人感染新型甲型禽流感H7N9病毒[J].临床检验杂志,2014(11):801-805. |
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作者姓名: | 王国政 崔大伟 谢国良 成军 孙长贵 李静云 金美彤 沈雄文 杨先知 楼剑洲 陈瑜 |
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作者单位: | 浙江大学医学院附属第一医院检验科,杭州 310003/中国人民解放军第117医院检验科,杭州 310013;浙江大学医学院附属第一医院检验科,杭州 310003;浙江大学医学院附属第一医院检验科,杭州 310003;中国人民解放军第117医院检验科,杭州 310013;中国人民解放军第117医院检验科,杭州 310013;浙江大学医学院附属第一医院检验科,杭州 310003/中国人民解放军第117医院检验科,杭州 310013;浙江大学医学院附属第一医院检验科,杭州 310003/中国人民解放军第117医院检验科,杭州 310013;浙江大学医学院附属第一医院检验科,杭州 310003/中国人民解放军第117医院检验科,杭州 310013;浙江大学医学院附属第一医院检验科,杭州 310003;浙江大学医学院附属第一医院检验科,杭州 310003;浙江大学医学院附属第一医院检验科,杭州 310003 |
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基金项目: | “十二五”国家科技重大专项(2012ZX10004-210)。 |
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摘 要: | 目的建立检测人感染新型甲型禽流感H7N9病毒的四重荧光定量RT-PCR方法。方法以人细胞RNA酶P(RNase P)基因为内参,用Primer Express3.0软件设计PCR特异性引物和探针。通过不同来源的呼吸道病毒进行特异性分析,构建质粒标准品用于分析该方法的灵敏度和重复性,并对1 896例临床标本进行回顾性检测。结果该方法检测甲型流感病毒(Flu A)、H7、N9与RNase P灵敏度均达102copies/m L,特异性达100%,每对引物和探针只检测出相应的病毒,无交叉反应,检测变异系数(CV)均低于1.55%。用该法检测1 896例临床标本,结果 Flu A 235例,H7N9 127例,与其他试剂报告结果完全一致。结论建立的四重荧光定量RT-PCR法可快速检测H7N9病毒,灵敏度与特异性好,可用于H7N9病毒感染患者的早期诊断。
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关 键 词: | 甲型禽流感 H7N9 检测 RNA酶P 四重荧光定量PCR |
收稿时间: | 2014/7/28 0:00:00 |
A four multiplex fluorescent quantitative RT-PCR assay for the detection of novel avian origin influenza A(H7N9) virus in human infections |
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Abstract: | |
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Keywords: | avian origin influenza A H7N9 detection RNase P four multiplex fluorescent quantitative RT-PCR |
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