| 生殖支原体环介导等温扩增检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 杨天,陈璐斯,胡一珉,周瑾,吴建茹,周良佳,谢彦昕,王蓓. 生殖支原体环介导等温扩增检测方法的建立[J]. 临床检验杂志, 2014, 0(11): 860-862 |
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| 作者姓名： | 杨天 陈璐斯 胡一珉 周瑾 吴建茹 周良佳 谢彦昕 王蓓 |
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| 作者单位： | 东南大学公共卫生学院流行病与卫生统计学教研室，南京 210009;东南大学公共卫生学院流行病与卫生统计学教研室，南京 210009;东南大学公共卫生学院流行病与卫生统计学教研室，南京 210009;东南大学公共卫生学院流行病与卫生统计学教研室，南京 210009;东南大学公共卫生学院流行病与卫生统计学教研室，南京 210009;东南大学公共卫生学院流行病与卫生统计学教研室，南京 210009;东南大学公共卫生学院流行病与卫生统计学教研室，南京 210009;东南大学公共卫生学院流行病与卫生统计学教研室，南京 210009 |
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| 基金项目： | 国家大学生创新训练计划项目（1210286101）。 |
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| 摘 要： | 目的建立检测生殖支原体(M.genitalium,Mg)的环介导等温扩增方法。方法根据Gen Bank公布的Mg核苷酸序列,设计4条特异性引物,进行PCR反应,对内、外引物浓度,d NTPs和Mg SO4浓度及Bst DNA聚合酶用量等进行优化,建立Mg LAMP的检测方法并进行特异性和敏感性评价;对20份HIV感染者的DNA样本分别进行LAMP和常规PCR检测。结果内、外引物浓度分别为1.6和0.2μmol/L,d NTPs浓度为1.6 mmol/L,Mg SO4浓度为12 mmol/L,Bst DNA聚合酶用量为8 U时,LAMP反应效果较好;用该体系检测同源关系较近的穿通支原体(M.penetrans,Mpe)、梨支原体(M.pirum,Mpi)均呈阴性;对Mg的检测灵敏度可达10-7;20份HIV感染者用LAMP法及常规PCR法各检出Mg阳性标本5份,两法的检测结果一致。结论建立的Mg LAMP检测方法的特异性、灵敏度较好,成本低廉,适合临床应用。
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| 关 键 词： | 生殖支原体；环介导等温扩增 |
| 收稿时间： | 2014-03-13 |
Preliminary establishment of a loop-mediated isothermal amplification assay for detection of Mycoplasma genitalium |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Mycoplasma genitalium loop-mediated isothermal amplification |
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