| 来氟米特干预肾小球系膜细胞Smad2的表达及Ⅳ型胶原分泌的体外研究 |
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| 引用本文： | 胡雯辉,于力,温跃强,张瑶,郝志宏,陈蓉燕. 来氟米特干预肾小球系膜细胞Smad2的表达及Ⅳ型胶原分泌的体外研究[J]. 广州医药, 2013, 44(3): 1-6 |
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| 作者姓名： | 胡雯辉 于力 温跃强 张瑶 郝志宏 陈蓉燕 |
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| 作者单位： | 广州医学院附属广州市第一人民医院儿科,510180 |
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| 基金项目： | 广东省自然科学基金项目(项目编号：5000424)广州市科技计划项目(项目编号：2012A011028) |
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| 摘 要： | 目的观察来氟米特(leflunomide,LEF)在转化生长因子β1(TGF-β1)刺激大鼠肾小球系膜细胞(GMC)表达Smad2及Ⅳ型胶原(ColⅣ)过程中发挥的作用。方法建立体外培养大鼠肾小球系膜细胞模型,经鉴定后第7代用于实验。按照对大鼠肾小球系膜细胞模型处理方式不同,实验分4组,对照组(只加培养液),TGF-β1组(TGF-β1 5 ng/ml),LEF-1组(LEF 5 ng/ml+TGF-β1 5 ng/ml)和LEF-2组(LEF 50 ng/ml+TGF-β1 5 ng/ml)。分别于15min、30min、1h、2h和6h收集标本,用酶联免疫吸附测定(ELISA)方法测定细胞培养上清液的ColⅣ胶原蛋白表达量的变化。用间接免疫荧光法检测各组磷酸化Smad2(P-Smad2)蛋白表达的变化;采用荧光半定量RT-PCR法检测各组Smad2 mRNA表达的变化。结果在各时间点,TGF-β1刺激组ColⅣ分泌量高于对照组(P<0.05),LEF各组Ⅳ胶原分泌低于TGF-β1(P<0.05)。对照组P-Smad2蛋白有少量的表达;TGF-β1组表达升高,有统计学意义(P<0.05),与TGF-β1组相比,两LEF组P-Smad2表达下降,有统计学意义(P<0.05)。肾小球系膜细胞中,TGF-β1组Smad2 mRNA表达高于对照组。LEF-1组和LEF-2组Smad2 mRNA表达水平低于TGF-β1组(P<0.01)。但两LEF组间比较无统计学意义(P>0.05)。LEF干预作用有时间性,随时间延长,其LEF干预作用逐渐减弱。结论经TGF-β1刺激后,体外培养的大鼠肾小球系膜细胞磷酸化-Smad2表达及Ⅳ胶原分泌增加,来氟米特可降低Smad2表达和Ⅳ胶原分泌水平,减轻细胞外基质(ECM)的沉积,为来氟米特的肾脏保护作用提供实验依据。
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| 关 键 词： | 系膜细胞 TGF-β1 Smad2 Ⅳ胶原 来氟米特 |
Interventions of leflunomide on Smad2 expression and collagen type IV secretion of Rat Glommerular Mesangial Cell in |
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