GFP基因转染示踪成肌细胞植入体内的转归 |
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引用本文: | 荣书玲,卢永昕,廖玉华,王晓林,常超,王裕勤,杨刚.GFP基因转染示踪成肌细胞植入体内的转归[J].细胞与分子免疫学杂志,2006,22(3):385-387. |
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作者姓名: | 荣书玲 卢永昕 廖玉华 王晓林 常超 王裕勤 杨刚 |
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作者单位: | 1. 华中科技大学同济医学院附属协和医院心内科,湖北,武汉,430022 2. 长治医学院附属和平医院儿科,山西,长治,046000 |
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摘 要: | 目的实现绿色荧光蛋白(GFP)报告基因在成肌细胞中高效稳定持久的表达,观察成肌细胞作为基因的载体细胞植入SD大鼠体内后的转归。方法构建携带GFP的逆转录病毒载体(pLgXSN),经PT67包装,G418筛选得到稳定的产毒克隆,用含GFP的病毒上清感染成肌细胞。被感染的成肌细胞植入同种动物的后肢的肌肉内,观察其在同种动物体内的转归。于术后4周取动物后肢肌肉,在共聚焦显微镜下观察GFP的表达,HE染色观察组织的结构。结果经双酶切鉴定及测序鉴定证实重组逆转录病毒载体构建成功。转染成肌细胞后48h,在共聚焦显微镜的激光激发下可观察到明亮的绿色荧光,转染效率33%,G418筛选后转染效率达90%。术后4周,在HE染色及共聚焦显微镜下观察可见SD大鼠骨骼肌中转基因的GFP荧光阳性的成肌细胞已与宿主的成肌细胞融合。结论构建的重组逆转录病毒载体,能在成肌细胞中稳定持久的表达,成肌细胞可作为生物细胞工程治疗的载体细胞。
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关 键 词: | 绿色萤光蛋白 转染 成肌细胞 |
文章编号: | 1007-8738(2006)03-0385-03 |
收稿时间: | 2006-01-16 |
修稿时间: | 2006-02-20 |
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