| PEP-1-VP3融合蛋白的分离纯化与初步鉴定 |
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| 引用本文： | 蔡召忠,陈萍,邓守恒.PEP-1-VP3融合蛋白的分离纯化与初步鉴定[J].华西药学杂志,2015,30(2):160-162. |
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| 作者姓名： | 蔡召忠 陈萍 邓守恒 |
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| 作者单位： | 1. 湖北医药学院附属东风医院,湖北十堰,442000
2. 湖北医药学院附属人民医院肿瘤中心,湖北十堰,442000 |
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| 基金项目： | 湖北省卫生厅基金(QJX2008-42);湖北医药学院创新基金(2008CXZ02,2010XSA02);十堰市科技局基金(2010st24) |
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| 摘 要： | 目的构建融合蛋白PEP-1-VP3的原核表达质粒,并进行诱导表达和蛋白纯化。方法通过PCR方法自PGEX-6P-1/TAT-VP3质粒中扩增VP3基因,运用靶向克隆酶,将VP3基因插入到线性载体p ET15b-PEP-1中,构建重组表达质粒p ET15b-PEP-1-VP3,经测序证实构建成功后转化E.coli Rosetta,表达PEP-1-VP3融合蛋白,经Ni-NTA树脂亲和层析,进行SDS-PAGE及Western Blot分析鉴定。结果成功构建PEP-1-VP3融合蛋白原核表达载体,表达并纯化了17.6k D的PEP-1-VP3融合蛋白。结论所构建的PEP-1-VP3融合蛋白为体内抗肿瘤研究提供了理论基础。
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| 关 键 词： | PEP-1-VP3融合蛋白 分离 纯化 诱导表达 克隆 鉴定 |
Prokaryotic expression and purification of PEP-1-VP3 fusion protein |
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| CAI Zhao-zhong,CHEN Ping,DENG Shou-heng.Prokaryotic expression and purification of PEP-1-VP3 fusion protein[J].West China Journal of Pharmaceutical Sciences,2015,30(2):160-162. |
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| Authors: | CAI Zhao-zhong CHEN Ping DENG Shou-heng |
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| Institution: | CAI Zhao-zhong;CHEN Ping;DENG Shou-heng;Dongfeng Hospital,Hubei University of Medicine;Center of Oncology,Renmin Hospital,Hubei University of Medicine; |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | PEP-1-VP3 fusion protein Isolation Purification Protaryotic expression Clone Identify |
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