20kHz超声辐照SonoVue联合DDP、MMC、5-FU对裸鼠肝癌细胞增殖和凋亡的影响

目的了解20 k Hz超声辐照Sono Vue微泡联合化疗药顺铂(DDP)、丝裂霉素(MMC)、5-氟尿嘧啶(5-FU)对裸鼠肝癌移植瘤细胞增殖和凋亡的作用。方法肝癌Hepa G2细胞株注射48只裸鼠皮下,两周后成瘤,平均分成4组:对照组、超声组、化疗组、超声联合化疗组。对照组不采取任何处理。超声组裸鼠尾静脉注射声诺维微泡0.2 ml,低频超声(20k Hz,2 W/cm~2,占空比40%,每次1 min,隔天,共2周)辐照肿瘤。化疗组裸鼠尾静脉每次注射DDP(1 mg/kg)、MMC(0.5 mg/kg)及5-FU(5 mg/kg),隔天,共2周。超声联合化疗组,先进行2周超声辐照,后进行2周化疗。治疗结束,每组随机处死6只裸鼠,取标本。TUNEL检测肿瘤组织细胞凋亡,免疫组化检测Ki-67蛋白表达,电镜观察微血管结构。其余每组6只裸鼠继续饲养,记录最终生存时间。结果四组肿瘤细胞凋亡率分别为:0.08±0.05、0.43±0.11、0.47±0.11及0.79±0.11。超声+化疗组与对照组比较,t=13.41,P0.0001;与超声组比较,t=5.81,P=0.0021;与化疗组比较,t=3.63,P=0.0151。四组肿瘤组织Ki-67积分分别为:3.67±0.52、3.17±0.75、3±0.89、1.67±1.03。超声+化疗组与对照组比较,t=3.46,P=0.018;与超声组比较,t=2.7,P=0.0429;与化疗组比较,t=2.67,P=0.045。电镜显示:超声组、超声联合化疗组肿瘤微血管破裂,红细胞漏出组织间隙。对照组、化疗组肿瘤微血管壁清晰,无缺损。超声联合化疗组裸鼠生存期较长(χ~2=29.37,P0.0001)。结论低频超声辐照微泡联合化疗药物,可促进裸鼠肝癌组织细胞凋亡,抑制肿瘤细胞增殖。