胡椒碱对大鼠原代培养肝细胞β-GD活性的影响

目的:建立原代培养肝细胞模型,观察胡椒碱对肝细胞内β-GD活性的影响,为胡椒碱影响药物吸收和代谢的研究提供一定实验依据。方法:通过门静脉两步灌流法分离原代肝实质细胞后悬浮培养,采用台盼蓝拒染法测定细胞活率,并绘制生长曲线;加入不同浓度的胡椒碱,低温反复冻融细胞,测定上清液中β-GD活性变化。结果:两步灌注分离取得的肝细胞呈类圆形,细胞质透亮,细胞轮廓折光性很强;平均每只大鼠可获得肝细胞1×108个/ml左右,肝细胞存活率为85%;于1、2和3h时,胡椒碱的0.042,0.021,0.0105和0.0052mmol/L均可显著降低大鼠肝细胞里β-GD的OD值(P0.05～0.01)。结论:门静脉两步灌注法是一种细胞产量高,损伤小,纯度高的分离原代大鼠肝细胞的方法;胡椒碱可抑制大鼠离体肝细胞里β-GD的活性。