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生物素标记寡核苷酸探针探测扩增的病理性突变基因
作者姓名:王申五  阮幼林  刘敬忠  姜哲  高庆生  赵艳君  沈岩  吴冠云
作者单位:中国医学科学院基础医学研究所(王申五,阮幼林,刘敬忠,姜哲,高庆生,赵艳君,沈岩),中国医学科学院基础医学研究所(吴冠云)
摘    要:碱基突变可直接影响人类基因的功能,导致各种遗传病的发生。本文作者建立了用生物素标记寡核苷酸探针探测扩增的病理性突变基因的方法。标记时寡核苷酸的用量仅需6ng,在末端转移酶的催化下,把生物素标记的脱氧核苷酸连接到寡核苷酸的3’羟基末端。经分离纯化后,进行斑点杂交和Southern印迹杂交,最后用ABC系统(即:Avidin-Biotin-碱性磷酸酶复合物)酶标显示杂交信号。用两种寡核苷酸探针(β_(41-42)~Αβ_(41-42)~Τ等探针)分别与克隆化扩增的正常和突变的β-珠蛋白基因DNA杂交,结果表明:~(32)P探针

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