一种从链霉菌和大肠杆菌提取大分子量总DNA的新方法 |
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作者姓名: | 陈廷清 马云鹏 |
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作者单位: | 四川省肿瘤研究所,四川省肿瘤研究所 |
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摘 要: | 近年来,我们在进行基因工程试验中,探索建立了一种避免使用苯酚、简化操作程序的DNA提取方法。利用该法所得DNA不仅分子量大(约300kb),且纯度完全能满足内切酶消化,接连和转化。在提取链霉菌和大肠杆菌染色体DNA时,称1g湿菌体,加9ml溶菌缓冲液(50mMol/L Tris.Hcl PH8.0;25mmolL EDTA;0.3mol/l sucrose)。混匀菌体后加入1ml溶菌酶溶液(20mg/ml和200ul RNase
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