基质金属蛋白酶2基因启动子的甲基化状态对子宫内膜癌侵袭力调控的分子机制

目的：探讨DNA甲基化对子宫内膜癌细胞株中基质金属蛋白酶2（matrix metalloproteinases-2, MMP-2）基因表达的调控作用及DNA甲基化酶抑制剂5-氮-2’-脱氧胞苷(5-aza-2’-deoxycytidine, 5-aza-CdR)对子宫内膜癌侵袭能力的作用。方法：选取人子宫内膜癌细胞株Ishikawa和HEC-1A作为研究对象，采用亚硫酸氢盐修饰后的克隆测序法检测5-aza-CdR处理前后MMP-2启动子区CpG位点甲基化状态及其变化。用不同浓度的5-aza-CdR处理Ishikawa和HEC-1A细胞株后，利用实时定量PCR和Matrigel Invasion Transwell方法测定分析其mRNA水平表达和侵袭能力的变化。结果：在Ishikawa和HEC-1A细胞中检测到MMP-2基因启动子区域整体甲基化水平较低，但关键转录调控元件结合部位的CpG位点甲基化频率较高，在HEC-1A细胞中分别为80%和70%，在Ishikawa细胞中分别为60%和40%，5-aza-CdR作用后，其甲基化程度降低，HEC-1A细胞中分别为20%和10%，在Ishikawa细胞中完全去甲基化。不同浓度5-aza-CdR作用72 h后，各组细胞中MMP-2 mRNA表达水平、穿膜细胞数均明显上调，与对照组相比差异有统计学意义（P<0.05）。结论：MMP-2启动子区特异CpG位点的甲基化状态可能参与其转录水平表达的调控，5-aza-CdR可能通过上调MMP-2 mRNA表达促进子宫内膜癌细胞Ishikawa和HEC-1A的体外侵袭。

Methylation of matrix metalloproteinases-2 promoter in endometrial cancer invasion