洋葱中蒜氨酸酶的提取分离及酶活力测定

目的优选洋葱中蒜氨酸酶的提取工艺,并测定酶活力。方法首先建立了三波长分光光度法测定蒜氨酸酶活力,然后以新疆洋葱为原料,采用硫酸铵盐析法、PEG8000沉淀法和PEG6000沉淀法分别对蒜氨酸酶进行提取分离,同时还考察了蒜氨酸酶底物-蒜氨酸的提取方法。结果 三波长分光光度法的检测波长为λ1=426 nm、λ2=446 nm、λ3=506nm;回归方程ΔA=0.912 63C+0.006 98,相关系数r=0.999 8;方法回收率为99.2%～108.4%,RSD为2.41%。硫酸铵盐析法、PEG8000沉淀法和PEG6000沉淀法沉淀蒜氨酸酶的最佳饱和度分别是45%,20%,20%;最佳料液比1∶1,最佳打浆时间2 min,而蒜氨酸酶的最佳提取方法是20%PEG8000沉淀法;底物蒜氨酸的最佳提取方法是微波灭酶法。结论 研究结果为今后蒜氨酸酶提取工艺的进一步优化提供了指导。