生物碱类中药组分荧光标记方法的建立及评价

目的建立生物碱类中药组分的荧光标记方法,并对标记效果进行评价。方法以异硫氰酸荧光素和盐酸麻黄碱组成研究体系。使用带有偏振镜的荧光分光光度计测量出荧光各向异性值,以FITC荧光各项异性值对麻黄碱浓度的对数作图,得到荧光偏振曲线,计算出样品的标记比,进行标记效果的评价。结果生物碱类中药组分的较优标记条件为:100mmol.L-1,pH 9.0的碳酸盐缓冲溶液中,盐酸麻黄碱溶液浓度在1×10-6～1×10-3 mol.L-1,FITC浓度0.5 mmol.L-1,室温避光反应、过夜。绘制荧光偏振曲线,计算得到rB=0.327。通过测量计算可得盐酸麻黄碱浓度为2.0×10-5mol.L-1、FITC浓度为3×10-5 mol.L-1时标记液的标记比为1.23,与理论符合。结论建立了生物碱类中药组分的荧光标记方法,基于荧光各向异性测量标记比的新方法具有简便快速和灵敏度高的特点,可用于标记效果的评价。