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抗癌胚抗原单链抗体的原核表达及对人胃癌的检测
引用本文:徐宏勇,徐立,高建宏,杨建军,李开宗,窦科峰.抗癌胚抗原单链抗体的原核表达及对人胃癌的检测[J].世界华人消化杂志,2006,14(18):1780-1784.
作者姓名:徐宏勇  徐立  高建宏  杨建军  李开宗  窦科峰
作者单位:1. 解放军第451医院肝胆普外科,陕西省,西安市,710054
2. 第四军医大学西京医院全军消化病研究所,陕西省,西安市,710032
3. 第四军医大学西京医院肝胆外科,陕西省,西安市,710032
基金项目:国家高技术研究发展计划(863计划);陕西省西安市科技攻关项目
摘    要:目的:探讨T84.66单链抗体的原核表达及对6 种胃癌细胞系及胃癌组织的特异性亲和力.方法:将抗CEA单链抗体T84.66的cDNA插入噬菌粒载体pcANTAB5E,获得噬菌粒载体T84.66-scFv-pCANTAB5E.将后者转化入 E.coli HB2151,经β,D异丙基硫代半乳糖苷 (IPTG)诱导表达.采用细胞培养及免疫细胞/组织化学方法,检测胃癌细胞中及石蜡包埋的胃癌组织中的癌胚抗原表达.结果:SDS-PAGE及Western blot证实,T84.66 单链抗体蛋白分子正确表达.T84.66单链抗体可结合KATOIII,HGC-27和MKN45,表明这3种细胞表达了特异性肿瘤抗原;单链抗体不能结合SGC7901,GC803,BGC823.42例胃癌组织癌胚抗原阳性率早期和进展期分别为55%(6/11)和61%(19/31),在正常胃黏膜组织标本中无表达,二者之间存在显著性差异 (P<0.05).结论:KATOIII等胃癌细胞系可表达癌胚抗原.后者在胃癌组织表达水平较高,而正常胃组织不表达.

关 键 词:胃癌细胞  单链抗体  原核表达  癌胚抗原
修稿时间:2006年4月16日

Prokaryotic expression of anti-carcinoembryonic single-chain variable fragment and its value in detection of gastric carcinoma cells
Hong-Yong Xu,Li Xu,Jian-Hong Gao,Jian-Jun Yang,Kai-Zong Li,Ke-Feng Dou.Prokaryotic expression of anti-carcinoembryonic single-chain variable fragment and its value in detection of gastric carcinoma cells[J].World Chinese Journal of Digestology,2006,14(18):1780-1784.
Authors:Hong-Yong Xu  Li Xu  Jian-Hong Gao  Jian-Jun Yang  Kai-Zong Li  Ke-Feng Dou
Abstract:
Keywords:Gastric carcinoma  Single-chain fragment variable antibody  Prokaryotic expression  Carcinoembryonic antigen
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