| 钩藤STR基因及其启动子的克隆与分析 |
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| 引用本文： | 周浩,路星星,敖雯雯,廖海民,张明生,强玮.钩藤STR基因及其启动子的克隆与分析[J].药学学报,2022(5):1526-1536. |
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| 作者姓名： | 周浩 路星星 敖雯雯 廖海民 张明生 强玮 |
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| 作者单位： | 贵州大学生命科学学院/农业生物工程研究院山地植物资源保护与保护种质创新教育部重点实验室山地生态与农业生物工程协同创新中心 |
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| 摘 要： | 根据钩藤转录组中STR基因核心序列设计特异性引物,并进行RACE扩增,克隆到UrSTR基因(GeneBank:OL310251)的cDNA全长1 541 bp,编码345个氨基酸;采用染色体步移克隆到UrSTR基因启动子(GeneBank:OL310252)序列1 179 bp。系统进化发育树分析显示,钩藤UrSTR蛋白与同为茜草科的美丽帽柱木和短小蛇根草的STR蛋白聚为一类,其亲缘关系最近;亚细胞共定位实验表明UrSTR蛋白定位于液泡膜上;SDS-PAGE结果表明pET-28a-UrSTR重组蛋白成功表达且大小与预期相符;启动子顺式作用元件分析表明其含有光响应、胁迫响应和激素响应有关的多种调控元件;启动子活性分析UrSTR基因启动子具有转录活性。成功克隆了UrSTR基因及其启动子序列并对其进行生物信息学分析和启动子活性分析;后期需要优化UrSTR原核表达体系,为进一步纯化UrSTR蛋白研究其结构和功能奠定基础。
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| 关 键 词： | 钩藤 异胡豆苷合成酶 启动子 亚细胞定位 原核表达 |
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