双荧光探针分子两步标记益生菌在肠道原位活性分析研究

有效补充益生菌可有益肠道健康,但是益生菌在肠道原位活性的分析却鲜有报道。本研究通过将异硫氰酸荧光素(FITC)和5(6)-羧基四甲基罗丹明琥珀酰亚胺酯[5(6)-TAMRA-SE]分别与D-赖氨酸进行偶联,获得了两种颜色的荧光D-氨基酸(fluorescent D-amino acids, FDAAs)探针:绿色探针(fluorescein-D-lysine, FDL)和红色探针(TAMRA-D-lysine, TDL),并尝试对嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus, LA)、干酪乳杆菌(Lactobacillus casei, LC)和韦荣球菌(Veillonella atypica, VA) 3种益生菌进行了体外标记。随后将FDAAs应用到小鼠肠道菌群标记,建立方法考察了3种常用益生菌口服定植存活情况。所有动物实验方案经由广州中医药大学动物伦理委员会审查通过。结果表明,合成的两种FDAAs可以无毒且完全对3种益生菌进行体外标记;通过FDAAs两步标记口服益生菌可知,LA存活率较高为92.30%±1.67%, LC和VA的存活率相近,分别为84.13%±4....