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痰耐药结核分枝杆菌rpoB基因的快速检测及利福平耐药机制研究
引用本文:杨松,钟敏,张耀亭,王易伟.痰耐药结核分枝杆菌rpoB基因的快速检测及利福平耐药机制研究[J].江西医学院学报,2008,48(6):63-66.
作者姓名:杨松  钟敏  张耀亭  王易伟
作者单位:[1]中国人民解放军第175医院肺科,福建漳州363000 [2]重庆市结核基因诊断中心检验科,重庆400020
基金项目:福建省青年科技人才创新基金项目  
摘    要:目的快速检测痰耐药结核分枝杆菌rpoB基因,了解利福平耐药的分予机制。方法根据结核分枝杆菌rpoB基因的耐利福平决定区设计引物.用PCR方法从耐药肺结核患者痰及临床分离菌株扩增rpoB基因片段,对扩增获得的rpoB基因片段进行序列测定,比较分析耐多药、全耐、单耐利福平、全敏感或标准结核分枝杆菌株之间的基因序列差异。结果于6h内从耐药肺结核痰中快速检测到rpoB举因。耐多药菌株、全耐及单耐利福平分离菌株均检测有rpoB基因点突变,突变位点主要为531、516或526常见密码子,且绝大多数为单碱基突变,发现1例MDR-TB出现479位和531位密码子同时突变。敏感株和标准株无基因突变。结论PCR及序列分析方法可快速、准确检测结核分枝杆菌rpoB基岗及其突变,结核分枝杆菌埘利福平的耐药性与rpoB基因点突变有关。

关 键 词:耐药结核分枝杆菌  利福平  rpoB基因  聚合酶链式反应

Rapid Detection of rpoB Gene of Resistant Mycobacterium Tuberculosis in Sputum and Rifampin-resistant Mechanism
YANG Song,ZHONG Min,ZHANG Yao-ting,WANG Yi-wei.Rapid Detection of rpoB Gene of Resistant Mycobacterium Tuberculosis in Sputum and Rifampin-resistant Mechanism[J].Acta Academiae Medicinae Jiangxi,2008,48(6):63-66.
Authors:YANG Song  ZHONG Min  ZHANG Yao-ting  WANG Yi-wei
Institution:1.Department of Pneumology;175th Hospital of the Chinese People'sLiberation Army;Zhangzhou 363000;China;2.Department of Clinical Laboratories;Center of Tuberculosis;Gene Diagnosis of Chongqing;Chongqing 400020;China
Abstract:Objective To rapidly detect rpoB gene of Mycobacterium tuberculosis in sputum and to explore rifampin(RIF)-resistant mechanism.MethodsrpoB fragment was amplified from M.tuberculosisstrains from sputum specimens of drug-resistant inpatients or clinic isolates by PCR with a pair of primers designed according to rifampin resistance-determining region.The fragments of rpoB were sequenced.The difference of rpoB gene fragments sequences of clinical isolates among multidrug-resistant,all drugs-resistant,single RIF...
Keywords:drug-resistant mycobacterium tuberculosis  rifampin  rpoB gene  polymerase chain reaction  
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