| 人源噬菌体Fab抗体库构建过程中引物的优化和初步鉴定 |
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| 引用本文： | 包国强,马庆久,邢金良,杨向民,陈志南.人源噬菌体Fab抗体库构建过程中引物的优化和初步鉴定[J].免疫学杂志,2004,20(3):220-223. |
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| 作者姓名： | 包国强 马庆久 邢金良 杨向民 陈志南 |
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| 作者单位： | 1. 第四军医大学唐都医院普通外科,陕西,西安,710038
2. 第四军医大学基础部细胞工程研究中心,陕西,西安,710032 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 (30 0 70 842 ) |
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| 摘 要： | 目的 优化设计一套引物，扩增全套人抗体Fd片段和L链基因，改善扩增效率，益于人源噬菌体抗体库的构建。方法 根据V-BASE数据库提供的人抗体可变区胚系基因，在其家族分类基础上，根据FR1区5’端保守序列重新分组，设计特异性的5’端扩增引物。同时对设计引物的匹配情况进行分析，并应用PCR扩增和测序反应对其扩增效果进行鉴定。结果 Fd链5’端扩增引物有5条，κ轻链有6条5’端扩增引物，而λ轻链5’和3’扩增引物有10条。分析表明，人抗体可变区胚系基因与5’引物有较好的匹配率，数目较少，匹配率较高。PCR结果显示，全部的重链及轻链引物对均能高效扩增出特异性较高的目的片段。测序结果表明PCR扩增产物具有较好的亚类和可变区家族分布。结论 优化了一套扩增全套人抗体Fd片段和L基因的引物，为人源噬菌体抗体库的构建奠定了良好的基础。
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| 关 键 词： | 抗体库 Fab 引物 优化 |
| 文章编号： | 1000-8861(2004)03-0220-04 |
| 修稿时间： | 2003年6月9日 |
Optimization of the primers for the construction of human Fab antibody library |
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| BAO Guo-qiang ,MA Qing-jiu ,XING Jin-liang ,YANG Xiang-min ,CHEN Zhi-nan.Optimization of the primers for the construction of human Fab antibody library[J].Immunological Journal,2004,20(3):220-223. |
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| Authors: | BAO Guo-qiang MA Qing-jiu XING Jin-liang YANG Xiang-min CHEN Zhi-nan |
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| Institution: | BAO Guo-qiang 1,MA Qing-jiu 1,XING Jin-liang 2,YANG Xiang-min 2,CHEN Zhi-nan 2 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Antibody library Fab Primer Optimization |
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