基于MEK/ERK信号通路探讨阳和汤含药血清对乳腺癌4T1细胞的影响

目的 通过阳和汤含药血清干预小鼠乳腺癌4T1细胞，探索阳和汤对乳腺癌4T1细胞及其内丝裂原活化蛋白激酶（MEK）/细胞外调节蛋白激酶（ERK）信号通路的影响。方法 制备阳和汤SD大鼠含药血清。将其随机分组为空白组、阳和汤低、中、高剂量组（5.8、11.6、23.2 g·kg^-1），空白组用生理盐水代替。各组按10%含药血清和90% RMPI 1640完全培养基均匀混合，干预细胞。采用细胞增殖与活性检测（CCK-8）法分别在24、48、72 h检测阳和汤含药血清对4T1细胞增殖的影响；采用流式细胞术检测4T1细胞的凋亡情况；采用划痕实验检测4T1细胞迁移情况；采用Transwell实验检测细胞侵袭能力；采用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测MEK1/2、磷酸化（p）-MEK1/2、ERK1/2、p-ERK1/2、大鼠肉瘤病毒（RAS）蛋白的表达水平。结果 与空白组比较，阳和汤干预24、48、72 h，阳和汤含药血清低、中、高剂量组对4T1细胞增殖具有明显抑制作用（P<0.05，P<0.01）；阳和汤干预48 h，阳和汤含药血清低、中、高剂量组细胞凋亡率显著升高（P<0.01）；阳和汤含药血清低、中、高剂量组在24、48 h的细胞划痕愈合能力显著降低（P<0.01）；阳和汤含药血清低、中、高剂量组细胞侵袭能力显著降低（P<0.01）；阳和汤含药血清低、中、高剂量组细胞内MEK1/2、ERK1/2表达差异无统计学意义，p-MEK1/2、p-ERK1/2、RAS蛋白表达显著降低（P<0.01）。结论 阳和汤可抑制乳腺癌细胞4T1增殖、迁移、侵袭，促进其凋亡。其凋亡机制与MEK/ERK信号通路受抑制，p-MEK1/2、p-ERK1/2、RAS蛋白表达下调有关。

Effect of Yanghetang-containing Serum on Breast Cancer 4T1 Cells Based on MEK/ERK Signaling Pathway