HSP27在人不同转移性前列腺癌细胞株比较蛋白质组学的初步研究

目的 激素抵抗型前列腺癌(hormonal refractory prostate cancer,HRPC)是前列腺癌治疗的难点,虽然已有的研究揭示了一些产生HRPC机制,但目前仍然不能完全解释.蛋白质组学技术为研究HRPC的机制提供了新的工具.该文旨在应用蛋白质组学方法筛选人不同转移性前列腺癌细胞株的相关蛋白,并研究其与HRPC的关系,为进一步阐明HRPC发生的分子机制提供理论依据.方法 二维聚丙烯酰胺凝胶电泳(two dimensional electrophoresis,2-DE)技术分离人高转移性前列腺癌细胞株(PC-3M)和人低转移性前列腺癌细胞株(PC-3)间的总蛋白,用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption/ionization-time of flight-mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)对差异表达的蛋白质点进行鉴定.应用反义核酸技术将分离鉴定差异表达蛋白的反义核酸转染至PC-3M,Western blotting检测转染后差异蛋白的表达情况,MTT法检测转染后细胞存活率,流式细胞仪检测转染后细胞凋亡率.结果 在PC-3M细胞与PC-3细胞中鉴定出差异表达蛋白点,并用质谱分析证实其为蛋白质热休克蛋白27(heat shock protein 27,HSP27).用HSP27反义核酸转染PC-3M细胞,在不同浓度多西紫衫醇作用下,HSP27反义核酸转染的PC-3M细胞的存活率较对照错义核酸转染组明显降低(P＜0.05),流式细胞仪显示细胞凋亡率为26.5％,明显高于对照组(P＜0.05).结论 人高、低转移前列腺癌细胞株的HSP27表达存在明显差异,蛋白质差异表达有可能为进一步发现前列腺癌进展相关分子和阐明前列腺癌侵袭转移的分子机制提供实验证据.

Comparative proteomic initial study on HSP27 of human prostate cancer cell lines with different metastasis potential