促自噬剂AZD8055对U87起始细胞Notch通路相关蛋白的表达和成球能力的影响 |
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引用本文: | 陶震楠,易立,李涛,刘沛东,苑锋,马海文,童鹿青,解杨,白宇,杨学军.促自噬剂AZD8055对U87起始细胞Notch通路相关蛋白的表达和成球能力的影响[J].中华神经外科杂志,2018(3):299-303. |
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作者姓名: | 陶震楠 易立 李涛 刘沛东 苑锋 马海文 童鹿青 解杨 白宇 杨学军 |
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作者单位: | 天津医科大学总医院神经外科、天津市神经病学研究所 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(81472352);天津市应用基础与前沿技术研究计划重点项目(15JCZDJC36200) |
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摘 要: | 目的研究促自噬剂AZD8055对U87细胞株起始细胞Notch通路相关蛋白的表达和成球能力的影响。方法应用免疫磁珠法分选获得U87细胞株CD133阳性的胶质瘤起始细胞(GICs)。采用免疫荧光染色技术鉴定GICs细胞球干性标志物CDl33和Nestin,以及自噬相关蛋白LC3B和p62的表达。以CCK8检测AZD8055对U87起始细胞存活率的影响。采用Western blot检测AZD8055不同浓度处理组Notch1、Notch胞内域、Hes1、p62、LC3B蛋白的表达。通过单细胞成球实验观察AZD8055对GICs成球能力的影响。结果免疫荧光染色结果显示,GICs细胞球中CD133和Nestin呈阳性表达。CCK8检测结果提示,随着AZD8055浓度的增高,U87起始细胞的存活率逐渐降低。Western blot结果提示,与溶媒对照组相比,随着AZD8055浓度的升高,药物处理组的自噬水平增高,而Notchl通路相关蛋白的表达降低,且各浓度组之间的蛋白表达差异均有统计学意义(均P〈0.05)。免疫荧光染色结果提示,经AZD8055处理后U87起始细胞的LC3B表达明显升高,p62表达降低。单细胞成球实验显示,随着AZD8055药物浓度的增高,各组成球数目和细胞球体积递减,且差异有统计学意义(均P〈0.05),说明U87GICs的成球能力降低。结论AZD8055通过诱发自噬抑制了Notch通路相关蛋白的表达,并且AZD8055能够抑制U87GICs的成球能力。
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关 键 词: | 神经胶质瘤 自噬 受体 NOTCH 1 胶质瘤起始细胞 成球能力 |
The effect of autophagy inducer AZD8055 on expression of Notch pathway-related proteins and neurosphere formation in U87 initiating cells |
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Institution: | (Department of Neurosurgery, General Hospital of Tianjin Medical University, Tianjin Neurological Institute, Tianjin 300052, Chin) |
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Abstract: | Tao Zhennan, Yi Li, Li Tao, Liu Peidong, Yuan Feng, Ma Haiwen, Tong Luqing, Xie Yang, Bai Yu, Yang Xnejun.(Department of Neurosurgery, General Hospital of Tianjin Medical University, Tianjin Neurological Institute, Tianjin 300052, Chin) |
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Keywords: | Glioma Autophagy Receptor Notch 1 Glioma initiating cell Ability of neurosphere formation |
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