| 含乙型肝炎表面抗原基因重组腺相关病毒的构建及其基因的表达和功能初步研究 |
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| 引用本文： | 胡贵方,吴小兵,俞守义,董小岩,陈清,候云德. 含乙型肝炎表面抗原基因重组腺相关病毒的构建及其基因的表达和功能初步研究[J]. 南方医科大学学报, 2003, 23(6): 553-556 |
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| 作者姓名： | 胡贵方 吴小兵 俞守义 董小岩 陈清 候云德 |
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| 作者单位： | 1. 第一军医大学流行病教研室,广东,广州,510515
2. 中国预防医学科学院病毒学研究所,北京,100052 |
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| 基金项目： | 国家863课题(863-BH03-05-02)~~ |
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| 摘 要： | 目的构建含乙型肝炎表面抗原(HBsAg)基因的重组腺相关病毒(rAAV)并观察目的基因的表达和功能。方法采用PCR法从PTHBV-1质粒中扩增HBsAg基因(ayw 亚型);将PCR扩增产物插入腺相关病毒(AAV)表达质粒pSNAV中,构建重组质粒pSNAV-HBsAg;用脂质体转染的方法将重组质粒转入BHK-21细胞中,G418筛选得到转入重组质粒并能表达目的基因的细胞系BHK-HBsAg;用具有rAAV包装功能的HSV-1- HSV1-rc/△UL2感染BHK-HBsAg,纯化后得到rAAV-HBsAg;ELISA检测重组病毒表面抗原基因在BHK-21细胞和293细胞中的表达;用rAAV-HBsAg免疫BalB/C小鼠,RIA法检测血清中表面抗体的滴度。结果ELISA法检测到混合细胞系BHK-HBsAg中HBsAg的表达量为(28.6±6.7)ng/5×106细胞;rAAV-HBsAg感染BHK-21细胞和293细胞后均能检测到HBsAg的表达,表达量随感染复数的增加而升高;rAAV-HBsAg免疫的BalB/C小鼠能产生表面抗体(抗-HBs抗体)。结论rAAV-HBsAg在体外能表达,免疫动物能诱导体液免疫反应的产生。rAAV-HBsAg有希望成为乙型肝炎候选疫苗,也可以进一步用于探索慢性乙型肝炎的免疫治疗。
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| 关 键 词： | 肝炎表面抗原 乙型 基因表达 重组腺相关病毒 |
| 文章编号： | 1000-2588(2003)06-0553-04 |
| 修稿时间： | 2003-02-16 |
Construction of recombinant adeno-associated virus carrying hepatitis B surface antigen gene and preliminary study of the gene expression and function |
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| HU Gui-fang ,WU Xiao-bing ,YU Shou-yi ,DONG Xiao-yan ,CHEN Qing ,HOU Yun-de. Construction of recombinant adeno-associated virus carrying hepatitis B surface antigen gene and preliminary study of the gene expression and function[J]. Journal of Southern Medical University, 2003, 23(6): 553-556 |
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| Authors: | HU Gui-fang WU Xiao-bing YU Shou-yi DONG Xiao-yan CHEN Qing HOU Yun-de |
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| Affiliation: | HU Gui-fang 1,WU Xiao-bing 2,YU Shou-yi 1,DONG Xiao-yan 2,CHEN Qing 1,HOU Yun-de 21 Department of Epidemiology,First Military Medical University,Guangzhou 510515,China, 2 Institute of Virology,Chinese Academy of Preventive Medicine,Beijing 100052,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | hepatitis B surface antigens gene expression recombinant adeno-associated virus |
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