| 人肥大细胞羧基肽酶的单抗2A9识别表位的预测和鉴定 |
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| 引用本文： | 周艳春,侯一峰,陈霖霏,郑晓璇,何韶衡.人肥大细胞羧基肽酶的单抗2A9识别表位的预测和鉴定[J].第四军医大学学报,2006,27(20):1863-1866. |
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| 作者姓名： | 周艳春 侯一峰 陈霖霏 郑晓璇 何韶衡 |
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| 作者单位： | 汕头大学医学院变态反应与炎症学研究所,广东,汕头,515041 |
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| 摘 要： | 目的: 分析人肥大细胞羧基肽酶(hMC-CP)的单克隆抗体(mAb)2A9识别表位所在区域. 方法: 根据肥大细胞hMC-CP的二级结构、亲水性、表面可能性和抗原性指数,对hMC-CP的B细胞表位进行预测. 依据预测结果,采用缺失突变的方法,分别扩增编码hMC-CP N端第1～111(P1P2),97～202(P3P4)和1～202(P1P4)位氨基酸的cDNA,并构建重组原核表达载体pET-44/P1P2、pET-44/P3P4和pET-44/P1P4. 用IPTG诱导表达融合蛋白,并对表达产物进行SDS-PAGE和Western blot分析. 结果: B细胞表位预测结果显示,hMC-CP的N 端第1～202位氨基酸含有多个潜在的B细胞表位. PCR扩增出的3个目的片段,其DNA序列同NCBI公布的序列完全一致. Western blot结果显示: E.coli BL21 (DE3)表达的融合蛋白P3P4和P1P4均与mAb 2A9反应;而融合蛋白P1P2与mAb 2A9不发生反应. 结论: 用多参数综合测评的方法,可获得满意的hMC-CP B细胞表位预测结果,本研究中mAb 2A9识别的表位位于hMC-CP的112-202位氨基酸区域.
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| 关 键 词： | 肥大细胞羧基肽酶 表位 B淋巴细胞 预测 基因表达 |
| 文章编号： | 1000-2790(2006)20-1863-04 |
| 收稿时间： | 09 1 2005 12:00AM |
| 修稿时间： | 12 15 2005 12:00AM |
Prediction of B cell epitope of human mast cell carboxypeptidase and its identification by monoclonal antibody 2A9 |
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| ZHOU Yan-Chun,HOU Yi-Feng,CHEN Lin-Fei,ZHENG Xiao-Xuan,HE Shao-Heng.Prediction of B cell epitope of human mast cell carboxypeptidase and its identification by monoclonal antibody 2A9[J].Journal of the Fourth Military Medical University,2006,27(20):1863-1866. |
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| Authors: | ZHOU Yan-Chun HOU Yi-Feng CHEN Lin-Fei ZHENG Xiao-Xuan HE Shao-Heng |
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| Institution: | Allergy and Inflammation Research Institute, Medical College, Shantou University, Shantou 515041, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | mast cell carboxypeptidase(MC-CP) epitopes B-lymphocyte forecasting gene expression |
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