α_1-抗胰蛋白酶PCR定点突变体的构建与分析 |
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作者姓名: | 叶玲 刘建伟 金灵 逯好英 汲言山 孙淑英 |
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作者单位: | 解放军总医院老年医学研究所,军事医学科学院基础医学研究所三室 |
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基金项目: | 国家自然科学基金,总后卫生部“八、五”青年基金 |
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摘 要: | 利用一对寡核苷酸引物,对含有α_1-抗胰蛋白酶(α_1-AT)cDNA基因的质粒进行定点诱变,使358Met-ATG突变为Arg-AGG。经过Sanger双脱氧链要末端终止法进行DNA序列测定,表明α_1-AT被成功地定点突变。将突变得到的α_1-ATPitts基因克隆入pBV220载体中并进行表达,得到了有抗原活性的凝血酶抑制剂α_1-ATPitts表达产物。以一对引物代替两对引物,节省了引物合成的费用,方法简便、快速、经济。
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关 键 词: | α_1-抗胰蛋白酶突变体,凝血酶抑制剂,多聚酶链反应,定点突变,DNA序列测定,基因表达 |
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