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中国流行株C基因型HBV稳定复制表达小鼠模型的建立
引用本文:杨悦,高俪,许智慧,余双庆,李瑞生,黄鹏宇,乔艳,李进,董小岩.中国流行株C基因型HBV稳定复制表达小鼠模型的建立[J].解放军医学杂志,2016(10):793-797.
作者姓名:杨悦  高俪  许智慧  余双庆  李瑞生  黄鹏宇  乔艳  李进  董小岩
作者单位:1. 541004广西桂林 桂林医学院研究生院;100039北京 解放军302医院全军传染病研究所/临床研究管理中心;2. 100176北京,五加和分子医学研究所有限公司;3. 100039北京,解放军302医院全军传染病研究所/临床研究管理中心
基金项目:国家自然科学基金面上项目(81371852
摘    要:目的 构建稳定复制中国流行株C基因型HBV的小鼠模型.方法 将携带1.3倍C基因型HBV基因组(adr血清型)的重组腺相关病毒rAAV8-1.3HBV-C转导人肝癌细胞HuH7,采用ELISA法评估HBV抗原(HBsAg、HBeAg)在肝癌细胞中的表达.筛选高表达的重组病毒,经尾静脉注射入6~8周龄C57BL/6小鼠体内,建立HBV-C复制小鼠模型(实验组,n=8);同时建立文献已报道HBV-D复制小鼠模型(对照组,n=7,rAAV8-1.3HBV-D,ayw血清型).动态监测两组小鼠血清(眼底静脉丛采血)HBV DNA载量和HBsAg、HBeAg的抗原表达量;于第9周处死小鼠,HE染色观察肝组织病理改变,免疫组化染色分析HBsAg和HBcAg的表达.结果 重组病毒rAAV8-1.3HBV-C体外转导人肝癌细胞HuH7,72h后细胞上清中可检测到HBsAg和HBeAg的表达.小鼠注射重组病毒后第2、3、5、7、9周,血清HBV DNA存在稳定复制,血清HBeAg表达水平较稳定,但血清HBsAg表达存在波动.两组小鼠肝组织未见明显的炎性细胞浸润及组织结构异常,但可检测到HBsAg和HBcAg蛋白.结论 利用高嗜肝性重组8型腺相关病毒载体携带1.3倍C基因型HBV基因组体内转导C57BL/6小鼠,成功地建立了稳定复制并持续表达C基因型HBV的小鼠模型.

关 键 词:乙型肝炎病毒  基因型  模型  动物

Establishment of a mouse model stably replicating and expressing hepatitis B virus genotype C prevailed in China
Abstract:
Keywords:hepatitis B virus  genotype  models  animal
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