| 拟杆菌属实时荧光定量PCR的建立 |
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| 引用本文： | 张薇薇,杨晶艳,王嵬,黄玮,杨蕊嘉,裴晓方. 拟杆菌属实时荧光定量PCR的建立[J]. 现代预防医学, 2010, 37(17) |
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| 作者姓名： | 张薇薇 杨晶艳 王嵬 黄玮 杨蕊嘉 裴晓方 |
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| 作者单位： | 1. 四川大学华西公共卫生学院医学检验教研室,成都,610041
2. 江苏省疾病预防控制中心 |
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| 基金项目： | 达能膳食营养研究与宣教基金 |
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| 摘 要： | [目的]建立拟杆菌属TaqMan实时荧光定量PCR检测方法,为拟杆菌属的快速检测以及相关研究提供有用的工具.[方法]从GenBank中下载拟杆菌属细菌16S rRNA基因序列并进行同源性比较,选择保守区段进行引物和探针的设计.对反应条件进行优化后,通过重组质粒建立标准曲线,并对建立的方法进行灵敏度、特异性、重复性评价.[结果]所建立的实时荧光定量PCR直线回归方程的决定系数R为0.9957,检测灵敏度达到10'cfu/ml,检测时间不超过2 h,批内与批问5次重复性试验的变异系数CV均在1.19%～2.21%之间.[结论]所建立的拟杆菌属Taq-Man实时荧光PCR具有快速、定量、简便、准确的特点,为临床拟杆菌感染的快速诊断、肠道拟杆菌属的快速计数提供了有力的技术支持.
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| 关 键 词： | 拟杆菌属 实时荧光PCR 重组质粒 |
ESTABLISHMENT OF REAL-TIME FLUORESCENCE PCR FOR BACTEROIDES |
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