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人抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)在巴斯德毕赤酵母中表达与纯化
引用本文:于群,贺敏,宋丽雅,卜凤荣,王全立. 人抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)在巴斯德毕赤酵母中表达与纯化[J]. 军事医学科学院院刊, 2004, 28(4): 350-353
作者姓名:于群  贺敏  宋丽雅  卜凤荣  王全立
作者单位:军事医学科学院野战输血研究所,北京,100850
摘    要:目的 :在巴斯德毕赤酵母中进行表达及纯化AT Ⅲ ,以对其功能进行深入研究。方法 :将携带AT Ⅲ基因的表达载体电转染GS115细胞 ,用G4 18筛选抗性克隆 ,SDS PAGE与Western印迹检测及鉴定表达产物 ;采用生化法测定AT Ⅲ的表达量 ;利用凝血酶空斑法测定表达产物活性 ,经过Heparin hyperD柱纯化。结果 :Western印迹分析发现转移至膜上的表达产物能与抗AT Ⅲ单克隆抗体结合 ,证明成功地表达了AT Ⅲ ,纯度 >95 %。活性测定表明表达产物具有天然AT Ⅲ的生物活性。结论 :在巴斯德毕赤酵母中成功地表达与纯化AT Ⅲ ,得到同天然蛋白相似的比活性人AT Ⅲ。

关 键 词:抗凝血酶Ⅲ 毕赤酵母 基因表达
文章编号:1000-5501(2004)04-0350-04

Expression and purification of recombinant human antithrombin Ⅲ(AT-Ⅲ) in Pichia pastoris
YU Qun,HE Min,SONG Li-Ya,BU Feng-Rong,WANG Quan-Li. Expression and purification of recombinant human antithrombin Ⅲ(AT-Ⅲ) in Pichia pastoris[J]. Bulletin of the Academy of Military Medical Sciences, 2004, 28(4): 350-353
Authors:YU Qun  HE Min  SONG Li-Ya  BU Feng-Rong  WANG Quan-Li
Affiliation:YU Qun*,HE Min,SONG Li-Ya,BU Feng-Rong,WANG Quan-Li
Abstract:
Keywords:
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