人补体受体2-Fc融合蛋白真核表达载体的构建与表达 |
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引用本文: | 李鑫鑫,吴志豪,张传福,贾雷立,宋宏彬,徐元勇.人补体受体2-Fc融合蛋白真核表达载体的构建与表达[J].细胞与分子免疫学杂志,2014(1). |
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作者姓名: | 李鑫鑫 吴志豪 张传福 贾雷立 宋宏彬 徐元勇 |
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作者单位: | 军事医学科学院疾病预防控制所; |
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基金项目: | 国家自然科学基金(81072501) |
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摘 要: | 目的构建人补体受体2(CR2)-Fc融合蛋白基因表达载体,在中国仓鼠卵巢细胞(CHO)中表达人CR2-Fc蛋白。方法将人CR2片段和IgG1 Fc片段进行连接,克隆入PCI-neo表达载体。脂质体法将测序正确的重组真核表达载体转染CHO K1细胞进行蛋白表达,采用SDS-PAGE、Western blot法对蛋白表达进行检测和鉴定。结果利用双酶切及基因测序结果证实CR2-Fc基因序列正确,重组真核表达载体构建成功;SDS-PAGE检测纯化产物的相对分子质量(M r)与预期结果一致,Western blot法在同样位置检出条带。结论成功构建了CR2-Fc重组真核表达载体,获得了有活性的融合蛋白。
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关 键 词: | 补体受体 补体 蛋白表达 人类免疫缺陷病毒 |
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