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人Wilms瘤基因1重组腺病毒Ad5/F35的制备及感染树突状细胞后的鉴定
引用本文:张晓颖,金悦,张斌,陈虎.人Wilms瘤基因1重组腺病毒Ad5/F35的制备及感染树突状细胞后的鉴定[J].细胞与分子免疫学杂志,2014(2).
作者姓名:张晓颖  金悦  张斌  陈虎
作者单位:解放军307医院造血干细胞移植科CTC实验室;全军造血干细胞研究所;哈尔滨医科大学附属第一医院输血科;
基金项目:“十一五”新药创制重大专项(2009zx09503)
摘    要:目的构建人Wilms瘤基因1(WT1)重组腺病毒载体Ad5/F35并鉴定。方法运用不同病毒滴度的Ad5-EGFP和Ad5/F35-EGFP感染黑素瘤患者外周血树突状细胞(DC),用荧光显微镜检测EGFP的表达,选择对DC感染率高的腺病毒;同源重组构建Ad5/F35-WT1腺病毒载体,用免疫细胞化学和流式细胞术(FCM)检测WT1的表达。结果在相同滴度下,腺病毒载体Ad5/F35的感染优于Ad5;成功构建了Ad5/F35-WT1重组腺病毒,免疫细胞化学染色和FCM证实该病毒能有效介导WT1在DC中的表达。结论 Ad5/F35-WT1重组腺病毒能将WT1基因成功导入DC并有效表达。

关 键 词:WT基因  树突状细胞  Ad/F腺病毒  鸡尾酒
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