人Wilms瘤基因1重组腺病毒Ad5/F35的制备及感染树突状细胞后的鉴定 |
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引用本文: | 张晓颖,金悦,张斌,陈虎.人Wilms瘤基因1重组腺病毒Ad5/F35的制备及感染树突状细胞后的鉴定[J].细胞与分子免疫学杂志,2014(2). |
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作者姓名: | 张晓颖 金悦 张斌 陈虎 |
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作者单位: | 解放军307医院造血干细胞移植科CTC实验室;全军造血干细胞研究所;哈尔滨医科大学附属第一医院输血科; |
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基金项目: | “十一五”新药创制重大专项(2009zx09503) |
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摘 要: | 目的构建人Wilms瘤基因1(WT1)重组腺病毒载体Ad5/F35并鉴定。方法运用不同病毒滴度的Ad5-EGFP和Ad5/F35-EGFP感染黑素瘤患者外周血树突状细胞(DC),用荧光显微镜检测EGFP的表达,选择对DC感染率高的腺病毒;同源重组构建Ad5/F35-WT1腺病毒载体,用免疫细胞化学和流式细胞术(FCM)检测WT1的表达。结果在相同滴度下,腺病毒载体Ad5/F35的感染优于Ad5;成功构建了Ad5/F35-WT1重组腺病毒,免疫细胞化学染色和FCM证实该病毒能有效介导WT1在DC中的表达。结论 Ad5/F35-WT1重组腺病毒能将WT1基因成功导入DC并有效表达。
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关 键 词: | WT基因 树突状细胞 Ad/F腺病毒 鸡尾酒 |
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