体外神经干细胞三维药物筛选模型的构建 |
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引用本文: | 关水,陆瑞欣,刘天庆,马学虎,崔占峰.体外神经干细胞三维药物筛选模型的构建[J].中国药理通讯,2009,26(2). |
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作者姓名: | 关水 陆瑞欣 刘天庆 马学虎 崔占峰 |
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作者单位: | [1]大连理工大学干细胞与组织工程研究室,辽宁大连116024 [2]牛津大学科学与工程系,英国牛津 |
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摘 要: | 研究目的:建立中药对神经干细胞诱导转变为神经细胞的体外模型,不仅对研究脑的发育和分化以及神经系统疾病的治疗具有重要价值,而且也有助于了解中药的作用机制,为中药的临床应用提供坚实的科学依据。本研究评价体外海马神经干细胞在胶原凝胶内的生长情况,探讨胶原凝胶作为神经系统组织支架材料的可行性,以建立适合于干细胞药物筛选及作用机理研究的三维培养模型。研究方法:①细胞培养:体外培养来源于孕13天胎鼠的海马部位神经干细胞,传至第三代;根据胶原的特性,把神经干细胞均匀混合于胶原的预凝胶溶液中,便可形成“细胞.胶原”的凝胶三维结构。②检测指标:倒置相差显微镜和激光共聚焦显微镜观察胶原凝胶中神经干细胞的生长、伸展情况;通用免疫细胞化学方法及荧光显微技术鉴定神经干细胞,BrdU染色标记增殖的细胞;采用CCK-8法及Live/DeadViability/CytotoxicityKit试剂盒检测神经干细胞不同培养条件下的生存和增殖能力,筛选出最佳的胶原工作浓度。结果:①倒置相差显微镜下观察发现胶原凝胶中的神经干细胞生长状态良好;
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关 键 词: | 神经干细胞 药物筛选模型 体外模型 三维结构 细胞生长状态 免疫细胞化学方法 胶原凝胶 神经系统疾病 |
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