| 人Bub1基因shRNA真核表达质粒的构建及其对人卵巢癌细胞SKOV3紫杉醇敏感性的影响 |
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| 引用本文： | 周婷,王世宣,翁丹卉,卢运萍,马丁.人Bub1基因shRNA真核表达质粒的构建及其对人卵巢癌细胞SKOV3紫杉醇敏感性的影响[J].华中科技大学学报(医学版),2010,39(2). |
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| 作者姓名： | 周婷 王世宣 翁丹卉 卢运萍 马丁 |
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| 作者单位： | 华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科,武汉,430030 |
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| 基金项目： | 国家海外青年学者合作研究基金，国家重点基础研究发展计划资助项目 |
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| 摘 要： | 目的 构建人Bub1 shRNA真核表达质粒,鉴定该质粒对人卵巢癌SKOV3细胞中Bub1基因的抑制作用,并探讨其对SKOV3细胞紫杉醇敏感性的影响.方法 构建pEGFP-Bub1-shRNA质粒,将其经脂质体Lipo 2000TM转染SKOV3细胞后,通过RT-PCR及Western blot检测干扰效率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,MTT法比较转染前后SKOV3细胞的紫杉醇敏感性.结果 成功构建了pEGFP-Bub1-shRNA质粒;RT-PCR 和Western blot检测结果提示,转染后Bub1的mRNA和蛋白表达均显著降低;MTT和FACS提示,与对照组细胞相比,转染后SKOV3细胞生长抑制率及凋亡率明显降低(P<0.05).结论 pEGFP-Bub1-shRNA质粒能有效抑制Bub1 mRNA及蛋白的表达,并降低SKOV3细胞紫杉醇敏感性,该质粒的成功构建为进一步研究Bub1基因的生物学功能提供了工具.
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| 关 键 词： | Bub1基因 紫杉醇 耐药 卵巢癌 SKOV3细胞 |
Construction of pEGFP-Bub1-shRNA Recombinant Plasmid and Its Effect on the Sensitivity of SKOV3 Cells to Paclitaxel |
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