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乳腺癌间质成纤维细胞的分离、培养及鉴定
引用本文:张晓耀,康骅,孙海晨,刘爽,崔叶青,张琳,蔡伟.乳腺癌间质成纤维细胞的分离、培养及鉴定[J].中国普外基础与临床杂志,2011,18(11):1160-1164.
作者姓名:张晓耀  康骅  孙海晨  刘爽  崔叶青  张琳  蔡伟
作者单位:1. 首都医科大学宣武医院普外科 北京100053
2. 首都医科大学宣武医院普外科实验室 北京100053
基金项目:国家自然科学基金资助项目(项目编号:30872516)~~
摘    要:目的探讨乳腺癌间质成纤维细胞(BCSFs)分离、培养及鉴定的方法,为其功能的研究奠定基础。方法在无菌条件下,术中留取乳腺癌切除标本的部分癌组织块,剪切成1mm×1mm×1mm大小块后采用振荡联合Ⅰ型胶原酶和透明质酸酶消化法分离、培养癌组织间质成纤维细胞。通过观察细胞形态、免疫组织化学检测(CK、Vimentin、α-SMA以及TE-7)和流式细胞仪测定以鉴定其是否为间质成纤维细胞。结果 培养24h后有细胞贴壁生长,7~10d左右细胞近融合,可传代培养。经鉴定,BCSFs分离、培养的成功率为90%(18/20),其细胞特点为:细胞呈扁平梭形,两端有细胞质突起,有一个扁平卵圆形囊状的核,胞浆丰富;免疫组织化学检测显示CK(-)、Vimentin(+)、α-SMA(+)、TE-7(+);流式细胞仪检测CD34和CD45均为(+)。结论振荡结合双酶消化法可有效地分离、培养BCSFs。本方法为进一步研究BCSFs提供了一种新的细胞来源途径。

关 键 词:乳腺癌  间质  成纤维细胞  培养  鉴定

Separation, Culture, and Identification of Breast Cancer Stromal Fibroblasts
ZHA NG Xiao-yao,KANG Hua,SUN Hai-chen,LIU Shuang,CUI Ye-qing,ZHANG Lin,CAI Wei.Separation, Culture, and Identification of Breast Cancer Stromal Fibroblasts[J].Chinese Journal of Bases and Clinics In General Surgery,2011,18(11):1160-1164.
Authors:ZHA NG Xiao-yao  KANG Hua  SUN Hai-chen  LIU Shuang  CUI Ye-qing  ZHANG Lin  CAI Wei
Institution:ZHANG Xiao-yao1,KANG Hua1,SUN Hai-chen2,LIU Shuang2,CUI Ye-qing2,ZHANG Lin1,CAI Wei1.1.Department of General Surgery,Xuanwu Hospital of Capital Medical University,Beijing 100053,China,2.Laboratory of General Surgery
Abstract:
Keywords:Breast cancer  Stromal  Fibroblasts  Culture  Identification  
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