| 融合蛋白TAT-HIF-1α-PAS-B原核表达载体的构建、表达及纯化 |
| |
| 引用本文： | 戚华兵,汪仕良,王凤君.融合蛋白TAT-HIF-1α-PAS-B原核表达载体的构建、表达及纯化[J].第三军医大学学报,2006,28(22):2213-2215. |
| |
| 作者姓名： | 戚华兵 汪仕良 王凤君 |
| |
| 作者单位： | 第三军医大学西南医院全军烧伤研究所,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆,400038;第三军医大学西南医院全军烧伤研究所,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆,400038;第三军医大学西南医院全军烧伤研究所,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆,400038 |
| |
| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划(973计划) |
| |
| 摘 要： | 目的 构建蛋白转导结构域TAT和人缺氧诱导因子1α PAS-B结构域融合蛋白的原核表达载体,并在大肠杆菌中表达及纯化.方法 分别构建原核表达质粒pTAT-PAS-B、pET-PAS-B和pTAT-EGFP;在大肠杆菌BL21(DE3)pLyss内,以IPTG诱导融合蛋白的表达,表达产物经SDS-PAGE及Western blot分析鉴定,利用镍-亚硝胺乙酸-组氨酸(NiNTA-His)亲和层析法对重组蛋白进行纯化.结果 成功构建了PAS-B结构域的原核表达载体,经过优化表达和纯化条件,融合蛋白在IPTG诱导下获得特异性表达,纯化得到了高纯度的目的蛋白.结论 含人缺氧诱导因子1αPAS-B和TAT结构域融合蛋白的成功表达及纯化,为应用该融合蛋白调控体内HIF-1α的活性奠定了基础.
|
| 关 键 词： | 原核表达系统 TAT蛋白转导结构域 缺氧诱导因子1α PAS-B结构域 |
| 文章编号： | 1000-5404（2006）22-2213-03 |
| 收稿时间： | 2005-12-20 |
| 修稿时间： | 2006-06-30 |
| 本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录！ |
|
