| 慢病毒载体介导的 RNA干扰对 HDAC2基因表达的影响 |
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| 引用本文： | 刘燕青,黄健,黄韻祝,娄方方,孔维莹.慢病毒载体介导的 RNA干扰对 HDAC2基因表达的影响[J].贵阳医学院学报,2015(6). |
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| 作者姓名： | 刘燕青 黄健 黄韻祝 娄方方 孔维莹 |
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| 作者单位： | 1. 贵州医科大学医学检验学院,贵州贵阳,550004
2. 贵州医科大学附院生化科,贵州贵阳,550004 |
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| 摘 要： | 目的：构建组蛋白去乙酰化酶2（ HDAC2）基因的慢病毒表达载体，研究HDAC2基因在肝癌HepG2细胞中的表达。方法：将前期构建并鉴定正确的3条重组表达质粒pLKO.1-HDAC2-shRNA 1组、2组、3组及1条阴性对照pLKO.1-HDAC2-shRNAneg和空载体对照pLKO.1，运用脂质体法分别与包装质粒psPAX2和包膜质粒pMD2. G共同转染人胚肾细胞293T，制备具有感染能力慢病毒颗粒；收集、纯化含病毒颗粒的上清液并感染人肝癌HepG2细胞，设未处理HepG2细胞为空白对照，采用Real time PCR 和Western blotting检测感染48 h和72 h后HepG2细胞中HDAC2基因mRNA和蛋白表达水平，鉴定、分析重组质粒的干扰效果。结果：与空白对照组相比，3条干扰序列转染肝癌HepG2细胞后均能明显抑制HDAC2 mRNA的表达（ P＜0.05），其中以pLKO.1-HDAC2-shRNA 1组的抑制率更明显，达到82.09％；3条干扰序列均能明显抑制HDAC2蛋白的表达（ P＜0.05），以pLKO.1-HDAC2-shRNA 1组和3组的干扰效果最明显，但两者相比较差异无统计学意义（ P＞0.05）。结论：构建的重组质粒pLKO.1-HDAC2-shRNA能从转录水平和蛋白水平有效抑制HDAC2基因在HepG2细胞中表达。
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| 关 键 词： | 组蛋白去乙酰化酶2 RNA干扰 肝癌HepG2细胞 慢病毒载体 pLKO.1载体 |
The Inhibitation Expression of HDAC2 Gene Intereferred by Lentivirus Mediated RNA |
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| LIU Yanqing,HUANG Jian,HUANG Yunzhu,LOU Fangfang,KONG Weiying.The Inhibitation Expression of HDAC2 Gene Intereferred by Lentivirus Mediated RNA[J].Journal of Guiyang Medical College,2015(6). |
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| Authors: | LIU Yanqing HUANG Jian HUANG Yunzhu LOU Fangfang KONG Weiying |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | histone deacetylase2 RNA interference hepatocellular carcinoma HepG2 cells lenti-virus vector pLKO 1vector |
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