| 检测EV71和EV-U的TaqMan-LNA探针多重荧光RT-PCR的建立 |
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| 引用本文： | 茅凌翔,徐岚,葛琴娟,鲍务新,杨静,吴斌,陈建国,徐顺高,黄新祥,许化溪. 检测EV71和EV-U的TaqMan-LNA探针多重荧光RT-PCR的建立[J]. 临床检验杂志, 2010, 28(5): 327-329 |
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| 作者姓名： | 茅凌翔 徐岚 葛琴娟 鲍务新 杨静 吴斌 陈建国 徐顺高 黄新祥 许化溪 |
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| 作者单位： | 江苏大学基础医学与医学技术学院，江苏镇江 212013/镇江市疾病预防控制中心检验科，江苏镇江 212001;镇江市疾病预防控制中心检验科，江苏镇江 212001;镇江市疾病预防控制中心检验科，江苏镇江 212001;镇江市疾病预防控制中心检验科，江苏镇江 212001;镇江市疾病预防控制中心检验科，江苏镇江 212001;江苏省疾病预防控制中心急性传染病防治所，南京 210009;镇江市第一人民医院检验科，江苏镇江 212002;江苏大学基础医学与医学技术学院，江苏镇江 212013;江苏大学基础医学与医学技术学院，江苏镇江 212013;江苏大学基础医学与医学技术学院，江苏镇江 212013 |
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| 基金项目： | 江苏省预防医学基金资助课题(基金编号2007023) |
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| 摘 要： | 目的 建立一种针对手足口病病原体的快速准确检测方法。 方法 利用TaqMan-LNA探针建立多重荧光定量RT-PCR方法，同时检测肠道病毒71型(EV71)和肠道病毒通用型(EV-U)，用含有目的序列RNA的标准品制备标准曲线，对病毒进行准确定量,同时对该方法的特异性、灵敏度、重复性进行评估。结果 用TaqMan-LNA探针多重荧光RT-PCR法检测CoxA16、CoxB2、EV71病毒和其他人类病毒RNA，证实其特异性为100%；对EV71和EV-U的检测灵敏度均达到102拷贝/μl；将EV71和EV-U的RNA标准品进行重复性实验，其批内、批间变异系数分别为0.97%～2.02%和0.89%～2.13%。 结论 本方法灵敏度较高，特异性强，重复性好，适用于手足口病的临床检测。
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| 关 键 词： | TaqMan-LNA探针；多重荧光定量RT-PCR；肠道病毒71型(EV71)；肠道病毒通用型(EV-U)；手足口病 |
| 收稿时间： | 2009-12-03 |
| 修稿时间： | 2010-03-08 |
Detection of enterovirus 71 and universal enterovirus by multiplex real-time PCR with TaqMan-LNA probe |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | TaqMan-LNA probe multiplex real-time fluorescent quantitative PCR human enterovirus 71(EV71) universal enterovirus (EV-U) hand, foot and mouth disease (HFMD) |
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