| 摘 要： | 目的探究新型生物材料碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)团聚体对糖尿病大鼠坐骨神经病变的治疗作用。方法将聚乙烯精氨酸天冬氨酸甘油二酯(PEAD)、肝素和bFGF按50∶10∶1(m/m/m)的比例混合,制备成bFGF团聚体。Western蛋白印迹法检测该团聚体中bFGF含量,ELISA法检测团聚体中bFGF释放速率。雄性SD大鼠ip给予链脲佐菌素制备糖尿病大鼠模型,继续饲养8周使之发生外周神经病变,随机分为空载体组、bFGF治疗组和bFGF团聚体治疗组。bFGF治疗组每天im给予bFGF 200μg·kg~(-1),连续3 d;bFGF团聚体治疗组一次性im给予含等量bFGF的团聚体12.2 mg·kg~(-1);空载体组给予等体积的空载体(PEAD+肝素)。每周测量后肢足步印迹进行坐骨神经功能指数(SFI)的行为学评分。给药后第30天处死大鼠,收集两侧坐骨神经,HE染色进行病理学观察,DAPI荧光染色检测神经组织内细胞凋亡,Western蛋白印迹法检测细胞增殖标志物Ki67和增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白水平。结果 PEAD、肝素和bFGF按50∶10∶1配比制备的bFGF团聚体结合bFGF良好;ELISA释放曲线结果表明,该团聚体可缓释bFGF。大鼠行为学评价和病理指标检测结果显示,与正常对照组比较,空载体组大鼠SFI显著减小(P<0.01),神经纤维排列紊乱且内部脱髓鞘情况严重,而且组织内部细胞凋亡明显,Ki67和PCNA蛋白表达水平显著下降(P<0.01)。与空载体组比较,bFGF治疗组和bFGF团聚体治疗组SFI升高(P<0.05,P<0.01),神经纤维排列紊乱和内部脱髓鞘现象改善,组织内部细胞凋亡减少,且Ki67和PCNA蛋白表达显著增加(P<0.01)。与bFGF治疗组相比,bFGF团聚体治疗组SFI在治疗后第28天升高更加明显(P<0.05),神经纤维排列规整,脱髓鞘现象基本消失,组织内部细胞核的荧光强度与形态基本接近正常,Ki67和PCNA蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。结论新型生物材料PEAD能有效地结合bFGF并缓控其释放。该团聚体治疗糖尿病大鼠坐骨神经病变效果可能优于单纯bFGF给药。
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