微流芯片检测流感病毒多重逆转录聚合酶链反应产物的实验研究 |
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引用本文: | 居丽雯,蒋露芳,陈民,杨国翠,林玉尊,朱炜明,姜庆五.微流芯片检测流感病毒多重逆转录聚合酶链反应产物的实验研究[J].上海预防医学,2004,16(4):157-160. |
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作者姓名: | 居丽雯 蒋露芳 陈民 杨国翠 林玉尊 朱炜明 姜庆五 |
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作者单位: | 复旦大学公共卫生学院,上海,200032 |
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摘 要: | 目的 ] 建立应用微流芯片检测甲 1型、甲 3型、乙型流感病毒多重逆转录聚合酶链反应 (mRT -PCR)产物的方法 ,在mRT -PCR扩增核酸的基础上自动化灵敏的定量检测扩增产物 ,快速检测甲亚型、乙型流感病毒 ,帮助临床快速诊断和鉴别诊断其他呼吸道病毒感染 ,以及明确流感病毒在人群中感染、流行情况。 方法 ] 采用经MDCK细胞分离培养的甲 1型、甲 3型、乙型流感病毒毒株病毒液 ,使用 3组特异引物经mRT -PCR扩增核酸 ,扩增产物分别采用毛细管电泳技术经Caliper10 0 0微流芯片分析仪自动化检测和经 2 %琼脂糖凝胶电泳法检测。 结果 ] 设计三组引物对相应甲 1型、甲 3型、乙型流感病毒靶基因的mRT -PCR扩增产物片段分别为 43 0bp、2 10bp、3 91bp ,本实验mRT -PCR扩增产物经 2 %琼脂糖凝胶电泳 ,与Marker比照 ,DNA条带基本在此位点附近 ;产物采用毛细管电泳法经Caliper10 0 0微流芯片分析仪后 ,分别于 413bp、2 0 3bp、3 79bp处出现陡峭的峰 ,如图所示。 结论 ] 应用微流芯片采用毛细管电泳法可对流感病毒mRT -PCR产物进行定位及相对定量 ,有助于快速诊断流感病毒感染 ,有助于对流感的监测。
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关 键 词: | 微流芯片 多重逆转录聚合酶链反应 流感病毒 |
文章编号: | 1004-9231(2004)04-0157-04 |
修稿时间: | 2004年1月30日 |
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