心肌梗死后睫状神经营养因子表达的动态过程与迷走神经支配及重构

目的：探讨睫状神经营养因子在心肌梗死后的表达是否具有动态过程,及其在迷走神经重构中的作用.方法：①实验于2003-08/2004-02在哈尔滨医科大学附属第一医院中心实验室完成.选用健康清洁级Wistar雄性大鼠56只,分为心肌梗死后3,7,30 d取材的3个心肌梗死组及相应时间点取材的3个假手术组.心肌梗死模型的制作：将大鼠麻醉后,于左心耳与肺动脉圆锥间环绕左冠状动脉主干标志处结扎冠状动脉.假手术组为穿线后不结扎冠状动脉.②从各组大鼠梗死中心、梗死周边、室间隔和右室取材,通过原位杂交及免疫组化方法检测睫状神经营养因子的mRNA及其蛋白的表达、抗囊状乙酰胆碱转运体的免疫组化方法检测迷走神经支配,并通过图像分析测定心肌中睫状神经营养因子的阳性染色密度及迷走神经支配密度.③组间比较应用t检验,睫状神经营养因子与迷走神经支配的相关性分析采用线性相关分析.结果：术后41只大鼠存活.心肌梗死后3,7,30 d组分别为7和8及8只,其余18只大鼠为各假手术组（各组均为6只）.①心肌中睫状神经营养因子mRNA的表达：假手术组中未检测到睫状神经营养因子mRNA的表达.心肌梗死后7和30 d组梗死周边明显高于心肌梗死后3 d组（t=2.986,3.025,P＜0.01）;心肌梗死后30 d组室间隔明显高于心肌梗死后3d组（t=3.126,P＜0.01）.②心肌中睫状神经营养因子蛋白的表达：假手术组中未检测到睫状神经营养因子蛋白的表达.仅在心肌梗后30 d组的梗死周边和室间隔心肌中检测到睫状神经营养因子蛋白的表达[（9.54&;#177;2.36）%,（11.25&;#177;4.60）%].③心肌中迷走神经支配密度：心肌梗死组中梗死中心区在心肌梗死后不同时间为0.心肌梗死后30 d组梗死周边明显高于心肌梗死后3和7 d组及相应假手术组（t=2.452～3.186,P＜0.05～0.01）.心肌梗死后室间隔和右心室7和30 d组明显高于相应假手术组（t=2.327～3.467,P＜0.05～0.01）;心肌梗死后30 d组室间隔和右心室明显高于心肌梗死后3和7 d组（t=2.506～3.332,P＜0.05～0.01）.④相关性：心肌梗死后7 d组梗死周边心肌细胞中睫状神经营养因子mRNA的表达与迷走神经支配呈显著正相关（r=0.51,P＜0.05）,心肌梗死后30 d组室间隔心肌细胞中睫状神经营养因子mRNA的表达与迷走神经支配也呈显著正相关（r=0.65,P＜0.05）.结论：①睫状神经营养因子可能主要在心肌梗死等病理状态下发挥一定的作用.②睫状神经营养因子可能在心肌局部发挥其神经营养作用进而参与心肌梗死后的神经重构及神经内分泌的调节过程.

Dynamic process of the expression of ciliary neurotrophic factor and the innervation and reconstitution of vagus nerve after myocardial infarction