真核翻译起始因子-3c在结肠癌细胞中的表达及其对细胞增殖的影响

目的:探讨真核翻译起始因子-3c(eukaryotic translation initiation factor 3c,eIF3c)在结肠癌细胞中的表达及其对细胞增殖的影响.方法:在5种结肠癌细胞株(RKO,HCT116,SW480,SW620和LoVo)中检测eIF3c的mRNA水平.构建eIF3c特异性siRNA慢病毒载体,用其感染结肠癌细胞,并设对照组.采用Real-time PCR和Western blotting方法分别从mRNA和蛋白质水平检测eIF3c基因的表达情况,通过MTT和集落形成实验观察结肠癌细胞的增殖率,评估eIF3c对结肠癌细胞增殖能力的影响.结果:5种结肠癌细胞株中eIF3c均为高表达,以RKO细胞中eIF3c表达最高,故被用于进一步RNA干扰研究.成功构建eIF3c-shRNA干扰体系并稳定转染RKO细胞后,与对照组比较,干扰组eIF3c mRNA下降了70％(P＜0.001),蛋白表达水平明显降低;MTT结果显示,干扰组细胞增殖水平明显低于阴性对照组(1∶60,P＜0.01);沉默eIF3c导致RKO细胞的集落数量显著减少,为对照组的35％ (P＜0.01),集落大小显著小于对照组;eIF3c与细胞周期相关,沉默eIF3c导致G0/G1期细胞的比例增加了8％ (P＜0.001),G2/M期细胞的比例增加了5％(P＜0.01),S期细胞的比例显著减少(12％),P＜0.001.结论:eIF3c在结肠癌细胞中高表达,沉默eIF3c基因可显著抑制结肠癌细胞的增殖能力,提示eIF3c在结肠癌的发生、发展中起重要作用,抑制eIF3c的表达有望被用于治疗结肠癌.

Expression of Eukaryotic Translation Initiation Factor-3c and Its Impact on the Proliferation of Colon Cancer Cells