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| 兔抗人细胞色素P450 1A2多克隆抗体的制备及鉴定 | |
| 引用本文： | 刘海英,杨微,李郁梅,郭蕾,吴春玲,徐东花,唐晓波,朱大岭. 兔抗人细胞色素P450 1A2多克隆抗体的制备及鉴定[J]. 中国免疫学杂志, 2007, 23(5): 448-451 |
| 作者姓名： | 刘海英 杨微 李郁梅 郭蕾 吴春玲 徐东花 唐晓波 朱大岭 |
| 作者单位： | 1. 哈尔滨医科大学药学院生物制药教研室,哈尔滨,150086 2. 哈尔滨医科大学大庆校区,大庆,163319 3. 黑龙江省生物医药工程重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地,哈尔滨,150086;哈尔滨医科大学药物与内源性物质代谢省高校重点实验室,哈尔滨,150086 |
| 基金项目： | 黑龙江省自然科学基金;国家高技术研究发展计划(863计划) |
| 摘 要： | 目的：制备兔抗人细胞色素P4501A2（CYP1A2）抗体及其特性鉴定。方法：利用生物信息学方法分析CYP1A2蛋白的序列，根据亲水性、抗原性、柔韧性及表面性等指标选择多肽序列，合成CYP1A2多肽，与载体蛋白钥孔戚血蓝素（Keyhole limpet hemocyanin，KLH）偶联，免疫日本大耳白兔制备抗CYP1A2抗体。辛酸-硫酸铵法纯化抗体，间接ELISA法测定抗体的效价及相对亲和力常数，Western blot鉴定其特异性，免疫组化进行定位。结果：获得针对小分子CYP1A2的抗体。该抗体效价为1∶16000；相对亲和力常数在10^5-10^6/M，具有实用价值；可与CYP1A2合成肽及天然CYP1A2出现特异性反应；可识别正常人肝脏组织CYP1A2；Western blot的结果显示，该抗体识别的相应抗原的相对分子质量为58000。结论：合成的多肽-KLH复合物具有免疫原性，可用于制备相应的抗体。制备的兔抗CYP1A2合成肽抗体可应用于酶联免疫吸附试验、免疫印迹、免疫组化实验。 |
| 关 键 词： | 合成肽 多克隆抗体 |
| 文章编号： | 1000-484X（2007）05-0448-04 |
| 修稿时间： | 2006-08-232006-09-18 |
Generation and characterization of rabbit polyclonal antibody against peptides of human CYP1A2 |
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| LIU Hai-Ying,YANG Wei,LI Yu-Mei,GUO Lei,WU Chun-Ling,XU Dong-Hua,TANG Xiao-Bo,ZHU Da-Ling. Generation and characterization of rabbit polyclonal antibody against peptides of human CYP1A2[J]. Chinese Journal of Immunology, 2007, 23(5): 448-451 | |
| Authors: | LIU Hai-Ying YANG Wei LI Yu-Mei GUO Lei WU Chun-Ling XU Dong-Hua TANG Xiao-Bo ZHU Da-Ling |
| Affiliation: | Harbin Medical University, Biopharmaceutical Department of College of Pharmacy, Harbin 150086, China |
| Abstract: | |
| Keywords: | CYP1A2 |
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